Изобретения

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложена бактерия Bacillus subtilis, продуцирующая 5?-аминоимидазол-4-карбоксамидрибозид (АИКАР). Указанная бактерия содержит дерегулированный pur-оперон на фоне инактивированного гена purH, модифицированные гетерологичные гены prs и purF E.coli под контролем сильного промотора PrpsF в составе хромосомы. При этом она обладает по крайней мере одной из следующих характеристик: содержит ген zwf под контролем сильного промотора PrpsF, содержит гетерологичный ген udhA под контролем сильного промотора PrpsF, содержит делецию гена sacB. Предложен также способ синтеза АИКАР путем культивирования в соответствующих условиях указанной бактерии. При этом культивирование осуществляют на среде следующего состава, мас. %: кормовые дрожжи 0,5-1,0, сахароза 10-13, изолят сои 2,5-3,5, кукурузный экстракт 3,0-5,0, мочевина 0,6-0,8, (??4)2??O4 0,8-1,6, пропинол 0,4-0,5, вода - остальное. Группа изобретений обеспечивает высокий уровень синтеза АИКАР до 20 г/л. 1. Бактерия Bacillus subtilis, продуцирующая 5?-аминоимидазол-4-карбоксамидрибозид, содержащая дерегулированный pur-оперон на фоне инактивированного гена purH, модифицированные гетерологичные гены prs и purF E.coli под контролем сильного промотора PrpsF в составе хромосомы, и отличающаяся по крайней мере одной из следующих характеристик: - содержит ген zwf под контролем сильного промотора PrpsF, - содержит гетерологичный ген udhA под контролем сильного промотора PrpsF, - содержит делецию гена sacB. 2. Бактерия по п. 1, представляющая собой штамм Bacillus subtilis АМ878, продуцирующий 5?-аминоимидазол-4-карбоксамидрибозид и полученный путем введения в хромосому штамма-реципиента Bacillus subtilis ВКПМ В-11156 гена zwf под контролем сильного промотора PrpsF. 3. Бактерия по п. 1, представляющая собой штамм Bacillus subtilis АМ890, продуцирующий 5?-аминоимидазол-4-карбоксамидрибозид и полученный путем введения в хромосому штамма-реципиента Bacillus subtilis АМ878 гетерологичного гена udhA E.coli под контролем сильного промотора PrpsF. 4. Бактерия по п. 1, представляющая собой штамм Bacillus subtilis АМ895, продуцирующий 5?-аминоимидазол-4-карбоксамидрибозид и полученный путем введения в хромосому штамма-реципиента Bacillus subtilis АМ890 делеции гена sacB. 5. Способ микробиологического синтеза пуринового нуклеозида 5?-аминоимидазол-4-карбоксамидрибозида путем культивирования в соответствующих условиях бактерии по п. 1 на среде следующего состава, мас. %: кормовые дрожжи 0.5-1.0 сахароза 10-13 изолят сои 2,5-3.5 кукурузный экстракт 3.0-5.0 мочевина 0.6-0.8 (??4)2??O4 0.8-1.6 пропинол 0.4-0.5 вода остальное

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Группа изобретений относится к медицине и касается антикоагулянтного лекарственного средства, представляющего собой синтетический дипептид Ac-Trp-Arg-Pip?HCl или его фармацевтически приемлемые соли. Группа изобретений также касается фармацевтической композиции, включающей в качестве действующего вещества указанное антикоагулянтное лекарственное средство и вспомогательные вещества - микрокристаллическую целлюлозу и стеариновую кислоту и/или ее фармацевтически приемлемую соль. Группа изобретений обеспечивает снижение риска неконтролируемого тромбообразования. 1. Антикоагулянтное лекарственное средство, представляющее собой синтетический дипептид Ac-Trp-Arg-Pip?HCl или его фармацевтически приемлемые соли. 2. Фармацевтическая композиция, включающая в качестве действующего вещества антикоагулянтное лекарственное средство по п. 1 и вспомогательные вещества: микрокристаллическую целлюлозу и стеариновую кислоту и/или ее фармацевтически приемлемую соль, при следующем соотношении компонентов, мас. %: - дипептид - 50,0 - стеариновая кислота и/или ее фармацевтически приемлимая соль - 1,0 - целлюлоза микрокристалическая - до 100,0. Увеличенное изображение (открывается в отдельном окне) 3. Фармацевтическая композиция по п. 2, отличающаяся тем, что в качестве соли стеариновой кислоты используют преимущественно магниевую соль. 4. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 2, 3, отличающаяся тем, что она выполнена в форме таблетки, капсулы, гранулы, саше. 5. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 2, 3, отличающаяся тем, что она выполнена в форме таблетки, покрытой кишечнорастворимой оболочкой. 6. Фармацевтическая композиция по п. 5, отличающаяся тем, что средняя масса ядра таблетки составляет 0,3 г. 7. Фармацевтическая композиция по пп. 5, 6, отличающаяся тем, что оболочка таблетки составляет до 10% от массы таблетки-ядра. 8. Фармацевтическая композиция по пп. 5-7, отличающаяся тем, что оболочка таблетки содержит кополимер метакриловой кислоты, кремния диоксид коллоидный безводный, натрия бикарбонат, натрия лаурилсульфат, тальк, титана диоксид, триэтил цитрат, приемлемые красители или готовую смесь для пленочного покрытия марки «Acryl-EZE® 93А White».

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Группа изобретений относится к микробиологии и биотехнологии и касается получения трансформантов дрожжей Schizosaccharomyces pombe, продуцирующих молочную кислоту. Предложен трансформант, несущий ген ldh, кодирующий лактатдегидрогеназу из Lactobacillus acidophilus или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее чем на 93%. Также предложен трансформант, несущий ген ldh, кодирующий лактатдегидрогеназу из Lactobacillus acidophilus или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее чем на 93%, в котором инактивирован или делетирован один или несколько генов, кодирующих ферменты, участвующие в пути биосинтеза этанола. Предложен трансформант, несущий ген ldh, кодирующий лактатдегидрогеназу из Lactobacillus acidophilus, или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее чем на 93%, и ген ldh, кодирующий лактатдегидрогеназу из Lactobacillus plantarum или Lactobacillus pentosus. Предложен трансформант, несущий ген ldh, кодирующий лактатдегидрогеназу из Lactobacillus acidophilus или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее чем на 93%, и ген ldh, кодирующий лактатдегидрогеназу из Lactobacillus plantarum или Lactobacillus pentosus, в котором инактивирован или делетирован один или несколько генов, кодирующих ферменты, участвующие в пути биосинтеза этанола. Также предложены варианты способа получения указанных трансформантов и способ микробиологического синтеза молочной кислоты. Группа изобретений обеспечивает эффективную продукцию молочной кислоты при небольшой концентрации побочного продукта. 1. Трансформант дрожжей Schizosaccharomyces pombe, продуцирующий молочную кислоту, содержащий ген ldh, кодирующий лактатдегидрогеназу из Lactobacillus acidophilus или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее чем на 93%. 2. Трансформант по п.1, в котором указанный ген ldh интегрирован в состав хромосомы. 3. Трансформант по п.1, в котором в качестве фермента, аминокислотная последовательность которого гомологична лактатдегидрогеназе из Lactobacillus acidophilus не менее чем на 93%, используют лактатдегидрогеназу из Lactobacillus kitasatonis, или Lactobacillus ultunensis, или Lactobacillus crispatus, или Lactobacillus gallinarum, или Lactobacillus amylovorus, или Lactobacillus kefiranofaciens. 4. Трансформант дрожжей Schizosaccharomyces pombe, продуцирующий молочную кислоту, содержащий ген ldh, кодирующий лактатдегидрогеназу из Lactobacillus acidophilus или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее чем на 93%, в котором инактивирован или делетирован один или несколько генов, кодирующих ферменты, участвующие в пути биосинтеза этанола. 5. Трансформант по п.4, в котором инактивирован ген adh1 и/или pdc2. 6. Трансформант дрожжей Schizosaccharomyces pombe, продуцирующий молочную кислоту, содержащий ген ldh, кодирующий лактатдегидрогеназу из Lactobacillus acidophilus или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее чем на 93%, и ген ldh, кодирующий лактатдегидрогеназу из Lactobacillus plantarum или Lactobacillus pentosus. 7. Трансформант дрожжей Schizosaccharomyces pombe продуцирующий молочную кислоту, содержащий ген ldh, кодирующий лактатдегидрогеназу из Lactobacillus acidophilus или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее, чем на 93%, и ген ldh, кодирующий лактатдегидрогеназу из Lactobacillus plantarum или Lactobacillus pentosus, в котором инактивирован или делетирован один или несколько генов, кодирующих ферменты, участвующие в пути биосинтеза этанола. 8. Трансформант по п.7, в котором инактивирован ген adh1 и/или pdc2. 9. Способ получения трансформанта по п.1, включающий введение в клетки дрожжей Schizosaccharomyces pombe гена ldh, кодирующего лактатдегидрогеназу из Lactobacillus acidophilus или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее чем на 93%. 10. Способ получения трансформанта по п.4, включающий введение в клетки дрожжей Schizosaccharomyces pombe гена ldh, кодирующего лактатдегидрогеназу, из Lactobacillus acidophilus или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее чем на 93%, и инактивацию или делетирование одного или нескольких генов, кодирующих ферменты, участвующие в пути биосинтеза этанола. 11. Способ получения трансформанта по п.6, включающий введение в клетки дрожжей Schizosaccharomyces pombe гена ldh, кодирующего лактатдегидрогеназу из Lactobacillus acidophilus или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее чем на 93%, и гена ldh, кодирующего лактатдегидрогеназу из Lactobacillus plantarum или Lactobacillus pentosus. 12. Способ получения трансформанта по п.7, включающий введение в клетки дрожжей Schizosaccharomyces pombe гена ldh, кодирующего лактатдегидрогеназу из Lactobacillus acidophilus или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее чем на 93%, гена ldh, кодирующего лактатдегидрогеназу из Lactobacillus plantarum или Lactobacillus pentosus, и инактивацию или делетирование одного или нескольких генов, кодирующих ферменты, участвующие в пути биосинтеза этанола. 13. Способ микробиологического синтеза молочной кислоты, включающий культивирование дрожжей Schizosaccharomyces pombe в питательной среде, отличающийся тем, что для культивирования используют трансформант по пп.1-8.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии, в частности к трансформанту дрожжей Pichia pastoris, продуцирующему ксиланазу и содержащему ген xyl, кодирующий эндо-1,4-?-ксиланазу из Paenibacillus brasilensis или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее чем на 93%. 1. Трансформант дрожжей Pichia pastoris, продуцирующий ксиланазу, содержащий ген xyl, кодирующий эндо-1,4-?-ксиланазу из Paenibacillus brasilensis или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее чем на 93%. 2. Трансформант по п. 1, в котором в качестве фермента, аминокислотная последовательность которого гомологична эндо-1,4-?-ксиланазе из Paenibacillus brasilensis не менее чем на 93%, используют эндо-1,4-?-ксиланазу из Paenibacillus polymyxa, или эндо-1,4-?-ксиланазу из Paenibacillus terrae, или эндо-1,4-?-ксиланазу из Paenibacillus peoriae, или эндо-1,4-?-ксиланазу из Paenibacillus jamilae.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии. Получен трансформант дрожжей Pichia pastoris, продуцирующий фитазу из Citrobacter freundii, несущий в составе хромосомы оптимизированный синтетический ген, кодирующий указанную фитазу, нуклеотидная последовательность которого приведена в перечне последовательностей под номером SEQ ID NO: 1. Данное изобретение расширяет арсенал рекомбинантных микроорганизмов, продуцирующих фитазы. Трансформант дрожжей Pichia pastoris, продуцирующий фитазу из Citrobacter freundii, несущий в составе хромосомы оптимизированный синтетический ген, кодирующий указанную фитазу, нуклеотидная последовательность которого приведена в перечне последовательностей под номером SEQ ID NO: 1.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии и касается получения рекомбинантных штаммов дрожжей Pichia pastoris, способных продуцировать эндо-1,4-?-ксиланазу. Получен трансформант дрожжей Pichia pastoris - продуцент ксиланазы, несущий в составе хромосомы ген, кодирующий эндо-1,4-?-ксиланазу, из Paenibacillus brasilensis, и дополнительные копии гена НАС1 из Pichia pastoris. Изобретение позволяет расширить ассортимент высокоэффективных продуцентов ксиланаз Трансформант дрожжей Pichia pastoris - продуцент ксиланазы, несущий в составе хромосомы ген, кодирующий эндо-1,4-?-ксиланазу из Paenibacillus brasilensis, и дополнительные копии гена НАС1 из Pichia pastoris.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии. Получены продуцирующие ?-глюканазу трансформанты дрожжей Pichia pastoris, содержащие ген bgl, кодирующий эндо-?-1,3(4)-D-глюканазу из Bacillus safensis или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее чем на 96%. Изобретение позволяет получать фермент с высокой степенью эффективности. 1. Трансформант дрожжей Pichia pastoris, продуцирующий ?-глюканазу и содержащий ген bgl, кодирующий эндо-?-1,3(4)-D-глюканазу из Bacillus safensis или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична эндо-?-1,3(4)-D-глюканазе из Bacillus safensis не менее чем на 96%. 2. Трансформант по п. 1, в котором в качестве фермента, аминокислотная последовательность которого гомологична эндо-?-1,3(4)-D-глюканазе из Bacillus safensis не менее чем на 96%, используют эндо-?-1,3(4)-D-глюканазу из Bacillus pumilus, или эндо-?-1,3(4)-D-глюканазу из Bacillus stratosphericus, или эндо-?-1,3(4)-D-глюканазу из Bacillus altitudinis, или эндо-?-1,3(4)-D-глюканазу из Bacillus aerius, или эндо-?-1,3(4)-D-глюканазу из Bacillus cellulasensis, или эндо-?-1,3(4)-D-глюканазу из Bacillus australimaris.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой трансформант дрожжей Komagataella kurtzmanii, продуцирующий эндо-?-1,3(4)-D-глюканазу из Bacillus pumilus или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична ей не менее чем на 96%, а именно эндо-?-1,3(4)-D-глюканазу из Bacillus safensis, или Bacillus stratosphericus, или Bacillus altitudinis, или Bacillus aerius, или Bacillus cellulasensis, или Bacillus australimaris. Изобретение позволяет получать эндо-?-1,3(4)-D-глюканазу с высокой степенью эффективности. 1. Трансформант дрожжей Komagataella kurtzmanii, продуцирующий ?-глюканазу, содержащий ген bgl, кодирующий эндо-?-l,3(4)-D-глюканазу из Bacillus pumilus или фермент, аминокислотная последовательность которого гомологична эндо-?-l,3(4)-D-глюканазе из Bacillus pumilus не менее чем на 96%. 2. Трансформант по п. 1, в котором в качестве фермента, аминокислотная последовательность которого гомологична эндо-?-l,3(4)-D-глюканазе из Bacillus pumilus не менее чем на 96%, используют эндо-?-l,3(4)-D-глюканазу из Bacillus safensis, или эндо-?-l,3(4)-D-глюканазу из Bacillus stratosphericus, или эндо-?-l,3(4)-D-глюканазу из Bacillus altitudinis, или эндо-?-l,3(4)-D-глюканазу из Bacillus aerius, или эндо-?-l,3(4)-D-глюканазу из Bacillus cellulasensis, или эндо-?-l,3(4)-D-глюканазу из Bacillus australimaris.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен температурочувствительный мутантный PRP8 мини-интеин из Penicillium chrysogenum для нерастворимой экспрессии в клетках Escherichia coli предшественника целевого белка. Мутантный PRP8 мини-интеин содержит замену аминокислотного остатка лейцина в положении 93 на остаток пролина, замену остатка цистеина в положении 1 на остаток аланина и необязательно содержит замену остатка цистеина в положении 11 на остаток тирозина в исходной последовательности PRP8 мини-интеина из Penicillium chrysogenum, состоящей из 157 аминокислотных остатков. При использовании мутантного интеина совмещаются нерастворимая экспрессия и самовыщепление очищенного белка из фьюжна в процессе ренатурации, не требующей использования протеаз. Степень процессинга для модельного целевого белка SUMO составляет более 50%, а для нейротоксина CVIE - около 60%. Температурочувствительный мутантный PRP8 мини-интеин из Penicillium chrysogenum, для нерастворимой экспрессии в клетках Escherichia coli предшественника целевого белка, содержащий замену аминокислотного остатка лейцина в положении 93 на остаток пролина, замену остатка цистеина в положении 1 на остаток аланина и необязательно содержащий замену остатка цистеина в положении 11 на остаток тирозина в исходной последовательности PRP8 мини-интеина из Penicillium chrysogenum, состоящей из 157 аминокислотных остатков.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к количественному определению молочной кислоты как в чистом виде, так и в продуктах питания, биологических и культуральных жидкостях. Способ спектрофотометрического определения молочной кислоты включает добавление исследуемого раствора к раствору хлорида железа(III), взятого в концентрации 0,1-0,3%, измерение оптической плотности полученного раствора при длине волны 380-405 нм и количественное определение концентрации лактата в исходном растворе с использованием калибровочного графика. Способ спектрофотометрического определения молочной кислоты, включающий добавление исследуемого раствора к раствору хлорида железа(III), взятого в концентрации 0,1-0,3%, измерение оптической плотности полученного раствора при длине волны 380-405 нм и количественное определение концентрации лактата в исходном растворе с использованием калибровочного графика.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)