Штаммы микроорганизмов

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложены рекомбинантный модифицированный глюкагоноподобный пептид-1 человека (рмГПП-1), способ его получения и штамм-продуцент E.coli ВКПМ В-12555. рмГПП-1 имеет последовательность SEQ ID NO 1. рмГПП-1 получают путем культивирования рекомбинантного штамма-продуцента E.coli ВКПМ В-12555 для получения предшественника пептида рмГПП-1 с последующим выделением полученного предшественника, его автокаталитическим расщеплением и очисткой целевого полипептида. На мышиной модели показано, что при подкожном или внутримышечном применении рмГПП-1 имеет показатели сахаропонижающей активности и продолжительности действия, сходные с показателями коммерческого препарата «Ликсумия», получаемого с использованием химического синтеза, и на протяжении минимум 3 ч после введения способен эффективно снижать уровень глюкозы в крови практически в два раза по сравнению с контролем. Штамм E. coli ВКПМ В-12555 позволяет осуществлять биосинтез предшественника рмГПП-1 на уровне 40% от суммарного белка клеток, что соответствует биосинтезу рмГПП-1 на уровне 13% от суммарного белка клеток. 1. Рекомбинантный глюкагоноподобный пептид-1 человека для понижения уровня сахара в крови, имеющий последовательность SEQ ID NO 1. 2. Рекомбинантный штамм-продуцент Escherichia coli ВКПМ В-12555, используемый для получения пептида по п. 1 и являющийся продуцентом предшественника пептида по п. 1. 3. Способ получения рекомбинантного глюкагоноподобного пептида-1 человека по п. 1 путем культивирования рекомбинантного штамма-продуцента по п. 2 для получения предшественника пептида по п. 1 с последующим выделением полученного предшественника, его автокаталитическим расщеплением и очисткой целевого полипептида.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Предложен рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-4299 – продуцент секретируемой ксилоглюканазы, кодируемой геном AsCeGH12b (SEQ ID NO: 1), клонированным из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612. Предложен способ микробиологического синтеза ксилоглюканазы, кодируемой указанным геном, путем культивирования указанного рекомбинантного штамма в аэробных условиях в подходящей питательной среде до максимального накопления целевого продукта. Группа изобретений позволяет получать термостабильную ксилоглюканазу семейства GH12, с оптимумом активности при 55°C, рН 5.0, в количестве не менее 30 единиц на 1 мл культуральной жидкости. 1. Рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-4299 - продуцент секретируемой ксилоглюканазы, кодируемой геном, соответствующим последовательности SEQ ID NO 1. 2. Способ микробиологического синтеза ксилоглюканазы, путем культивирования рекомбинантного штамма дрожжей Pichia pastoris, содержащего ген ксилоглюканазы, в аэробных условиях в подходящей питательной среде до максимального накопления целевого продукта, отличающийся тем, что в качестве продуцента используют рекомбинантный штамм по п.1, а целевым продуктом является ксилоглюканаза, соответствующая последовательности SEQ ID NO 2.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Группа изобретений относится к микробиологической промышленности. Заявлены штамм дрожжей Yarrowia lipolytica Y-3753ch и штамм дрожжей Yarrowia lipolytica Y4215Leu+, обладающие способностью продуцировать янтарную кислоту. Штаммы микроорганизмов дрожжей Yarrowia lipolytica депонированы во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационными номерами ВКПМ Y-4215 и ВКПМ Y-4297 соответственно. Заявленные Штаммы микроорганизмов могут быть использованы для получения чистой янтарной кислоты. Изобретение позволяет получить чистую янтарную кислоту. 1. Штамм дрожжей Yarrowia lipolytica ВКПМ У-4215 - продуцент янтарной кислоты. 2. Штамм дрожжей Yarrowia lipolytica ВКПМ У-4297 - продуцент янтарной кислоты.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложен рекомбинантный штамм Escherichia coli ВКПМ В-12683, продуцент ксилоглюканазы семейства GH12, кодируемой геном AsCeGH12b (SEQ ID NO 1), клонированным из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612. Штамм Escherichia coli ВКПМ В-12683 получен путем трансформации штамма Escherichia coli BL21-CODONPLUS (DE3)-R1PL плазмидой pET-AsCeGH12b (SEQ ID NO 3). Предложен также способ микробиологического синтеза ксилоглюканазы семейства GH12, кодируемой геном AsCeGH12b, клонированным из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612, путем культивирования штамма Escherichia coli ВКПМ В-12683, в аэробных условиях в подходящей питательной среде до максимального накопления целевого продукта. 1. Рекомбинантный штамм Escherichia coli ВКПМ В-12683 - продуцент ксилоглюканазы семейства GH12, кодируемой геном AsCeGH12b (SEQ ID NO 1), клонированным из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612, и полученный путем трансформации штамма Escherichia coli BL21-CODONPLUS (DE3)-R1PL плазмидой pET-AsCeGH12b (SEQ ID NO 3). 2. Способ микробиологического синтеза ксилоглюканазы, предусматривающий культивирование рекомбинантного штамма бактерии Escherichia coli, содержащего ген ксилоглюканазы, в аэробных условиях в подходящей питательной среде до максимального накопления целевого продукта, отличающийся тем, что в качестве продуцента используют рекомбинантный штамм по п. 1, а целевым продуктом является ксилоглюканаза семейства GH12, кодируемая геном AsCeGH12b, клонированным из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Представлен бесплазмидный рекомбинантный штамм Escherichia coli, обладающий конститутивной аспартазной активностью и полученный путем замены промотора гена aspA в штамме Escherichia coli MG1655 на промотор pG25 бактериофага Т5. Представлен способ синтеза L-аспарагиновой кислоты из фумарата аммония с использованием в качестве биокатализатора указанного рекомбинантного штамма в виде или свободных, или иммобилизованных клеток. Группа изобретений обеспечивает более эффективное получение L-аспарагиновой кислоты и позволяет сократить время ее получения в 3-4 раза за счет более высокой аспартазной активности биокатализатора. 1. Бесплазмидный рекомбинантный штамм Escherichia coli, обладающий конститутивной аспартазной активностью и полученный путем замены промотора гена aspA в штамме Escherichia coli MG1655 на промотор pG25 бактериофага Т5. 2. Способ синтеза L-аспарагиновой кислоты из фумарата аммония с использованием в качестве биокатализатора рекомбинантного штамма по п.1 в виде или свободных, или иммобилизованных клеток.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Изобретение относится к области биохимии, генной инженерии и биотехнологии, в частности к штамму Pichia pastoris ВКПМ Y-4269. Настоящий штамм является продуцентом секретируемой термостабильной ксилоглюканазы класса GH74. Указанная ксилоглюканаза кодируется синтетическим геном, соответствующим SEQ ID NO 1. Настоящее изобретение относится также к способу микробиологического синтеза ксилоглюканазы. Указанный способ предусматривает культивирование рекомбинантных микроорганизмов, содержащих ген ксилоглюканазы, в аэробных условиях в питательной среде до максимального накопления целевого продукта. Данная питательная среда включает источники углерода, азота и минеральные добавки. Указанный способ отличается тем, что в качестве продуцента используется рекомбинантный штамм Pichia pastoris ВКПМ Y-4269. Настоящее изобретение позволяет получать секретируемую термостабильную ксилоглюканазу класса GH74 с высоким выходом и чистотой. 1. Рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-4269 - продуцент секретируемой термостабильной ксилоглюканазы класса GH74, кодируемой синтетическим геном, соответствующим SEQ ID NO 1. 2. Способ микробиологического синтеза ксилоглюканазы, предусматривающий культивирование рекомбинантных микроорганизмов, содержащих ген ксилоглюканазы, в аэробных условиях в питательной среде, включающей источники углерода, азота и минеральные добавки до максимального накопления целевого продукта, отличающийся тем, что в качестве продуцента используют рекомбинантный штамм по п. 1.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Изобретения относятся к биотехнологии и могут быть использованы для производства масляной кислоты. Штамм анаэробных бактерий Clostridium tyrobutyricum, синтезирующий масляную кислоту с высокой селективностью (до 100%) и устойчивый к ее концентрации до 2,0 об. % в жидкой среде, депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ В-12465. Предложен способ микробиологического синтеза масляной кислоты, предусматривающий культивирование штамма С. tyrobutyricum ВКПМ В-12465 в анаэробных условиях в питательной среде, включающей источники углерода, азота и минеральные добавки. В качестве источника углерода питательная среда содержит 60 г/л глюкозы и 3 г/л ацетата аммония. Изобретения обеспечивают максимальное накопление масляной кислоты 27 г/л в культуральной жидкости без побочных продуктов. 1. Штамм анаэробных бактерий Clostridium tyrobutyricum ВКПМ В-12465 - продуцент масляной кислоты. 2. Способ микробиологического синтеза масляной кислоты, предусматривающий культивирование мутантного штамма анаэробных бактерий С. tyrobutyricum в анаэробных условиях в питательной среде, включающей источники углерода, азота и минеральные добавки, до максимального накопления целевого продукта, отличающийся тем, что в качестве штамма-продуцента используют штамм по п. 1, а в качестве источника углерода 60 г/л глюкозы и 3 г/л ацетата аммония.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Предложены варианты бактерий Escherichia coli, являющихся продуцентами янтарной кислоты. Бактерия Escherichia coli модифицирована таким образом, что гены асkА, pta, рохВ, ldhA, adhE, ptsG в ней инактивированы, экспрессия генов galP и glk усилена, и бактерия обладающий активностью пируват карбоксилазы. Также предложен вариант бактерии Escherichia coli, обладающий инактивированными генами ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, ptsG, iclR, усиленной экспрессией генов galP и glk, и активностью пируват карбоксилазы. Также предложен вариант бактерии Escherichia coli, обладающий инактивированными генами ackA, pta, рохВ, ldhA, adhE, ptsG, усиленной экспрессией генов galP и glk, усиленной экспрессией генов асеЕ, aceF и lpdA, и активностью пируват карбоксилазы. Также предложен вариант бактерии Escherichia coli, обладающий инактивированными генами асkА, pta, рохВ, ldhA, adhE, ptsG, iclR, усиленной экспрессией генов galP и glk, усиленной экспрессией генов асеЕ, aceF и lpdA, и активностью пируват карбоксилазы. Также предложен вариант бактерии Escherichia coli, обладающий инактивированными генами асkА, pta, рохВ, IdhA, adhE, ptsG, pflB, усиленной экспрессией генов galP и glk, усиленной экспрессией генов асеЕ, aceF и lpdA, и активностью пируват карбоксилазы. Также предложен вариант бактерии Escherichia coli, обладающий инактивированными генами асkА, pta, рохВ, ldhA, adhE, ptsG, pflB, iclR, усиленной экспрессией генов galP и glk, усиленной экспрессией генов асеЕ, aceF и lpdA, и активностью пируват карбоксилазы. Предложен способ получения янтарной кислоты с использованием указанных вариантов. Группа изобретений обеспечивает увеличение выхода янтарной кислоты. 1. Бактерия Escherichia coli - продуцент янтарной кислоты, модифицированная таким образом, что гены ackА, pta, рохВ, ldhA, adhE, ptsG в ней инактивированы, экспрессия генов galP и glk усилена, и бактерия обладает активностью пируват карбоксилазы. 2. Бактерия по п. 1, отличающаяся тем, что активность пируват карбоксилазы обеспечивается за счет введения в бактерию молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1. 3. Бактерия по п. 1, отличающаяся тем, что экспрессия генов galP и glk усилена за счет замены в хромосоме бактерии нуклеотидных последовательностей природных промоторов, контролирующих экспрессию генов galP и glk, на более сильные промоторы. 4. Бактерия Escherichia coli - продуцент янтарной кислоты, модифицированная таким образом, что гены ackA, pta, poxB, IdhA, adhE, ptsG, iclR в ней инактивированы, экспрессия генов galP и glk усилена, и бактерия обладает активностью пируват карбоксилазы. 5. Бактерия по п. 4, отличающаяся тем, что активность пируват карбоксилазы обеспечивается за счет введения в бактерию молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1. 6. Бактерия по п. 4, отличающаяся тем, что экспрессия генов galP и glk усилена за счет замены в хромосоме бактерии нуклеотидных последовательностей природных промоторов, контролирующих экспрессию генов galP и glk, на более сильные промоторы. 7. Бактерия Escherichia coli - продуцент янтарной кислоты, модифицированная таким образом, что гены аскА, pta, рохВ, ldhA, adhE, ptsG в ней инактивированы, экспрессия генов galP и glk усилена, экспрессия генов асеЕ, aceF и lpdA усилена, и бактерия обладает активностью пируват карбоксилазы. 8. Бактерия по п. 7, отличающаяся тем, что активность пируват карбоксилазы обеспечивается за счет введения в бактерию молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1. 9. Бактерия по п. 7, отличающаяся тем, что экспрессия генов galP и glk, а также генов асеЕ, aceF и lpdA усилена за счет замены в хромосоме бактерии нуклеотидных последовательностей природных промоторов, контролирующих экспрессию генов galP и glk, а также генов оперона aceEF-lpdA, на более сильные промоторы. 10. Бактерия Escherichia coli - продуцент янтарной кислоты, модифицированная таким образом, что гены ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, ptsG, iclR в ней инактивированы, экспрессия генов galP и glk усилена, экспрессия генов асеЕ, aceF и lpdA усилена, и бактерия обладает активностью пируват карбоксилазы. 11. Бактерия по п. 10, отличающаяся тем, что активность пируват карбоксилазы обеспечивается за счет введения в клетки бактерии молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1. 12. Бактерия по п. 10, отличающаяся тем, что экспрессия генов galP и glk, а также генов асеЕ, aceF и lpdA усилена за счет замены в хромосоме бактерии нуклеотидных последовательностей природных промоторов, контролирующих экспрессию генов galP и glk, а также генов оперона aceEF-lpdA, на более сильные промоторы. 13. Бактерия Escherichia coli - продуцент янтарной кислоты, модифицированная таким образом, что гены ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, ptsG, pflB в ней инактивированы, экспрессия генов galP и glk усилена, экспрессия генов асеЕ, aceF и lpdA усилена, и бактерия обладает активностью пируват карбоксилазы. 14. Бактерия по п. 13, отличающаяся тем, что активность пируват карбоксилазы обеспечивается за счет введения в бактерию молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1. 15. Бактерия по п. 13, отличающаяся тем, что экспрессия генов galP и glk, а также генов асеЕ, aceF и lpdA усилена за счет замены в хромосоме бактерии нуклеотидных последовательностей природных промоторов, контролирующих экспрессию генов galP и glk, а также генов оперона aceEF-lpdA, на более сильные промоторы. 16. Бактерия Escherichia coli - продуцент янтарной кислоты, модифицированная таким образом, что гены ackА, pta, рохВ, ldhA, adhE, ptsG, pflB, iclR в ней инактивированы, экспрессия генов galP и glk усилена, экспрессия генов асеЕ, aceF и lpdA усилена, и бактерия обладает активностью пируват карбоксилазы. 17. Бактерия по п. 16, отличающаяся тем, что активность пируват карбоксилазы обеспечивается за счет введения в бактерию молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1. 18. Бактерия по п. 16, отличающаяся тем, что экспрессия генов galP и glk, а также генов асеЕ, aceF и lpdA усилена за счет замены в хромосоме бактерии нуклеотидных последовательностей природных промоторов, контролирующих экспрессию генов galP и glk, а также генов оперона aceEF-lpdA, на более сильные промоторы. 19. Способ получения янтарной кислоты путем культивирования бактерии по п. 1, или 4, или 7, или 10, или 13, или 16 в питательной среде и выделения янтарной кислоты из культуральной жидкости.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Группа изобретений относится к штамму бактерий Escherichia coli FUM1.0, являющемуся продуцентом фумаровой кислоты, и способу получения фумаровой кислоты с использованием данного штамма. Штамм получен путем инактивации генов ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, pflB, frdA, frdB, sdhA, sdhB, aceA, асеВ и ptsG и усиления экспрессии генов galP и glk в штамме Escherichia coli K-12 MG1655. Способ получения фумаровой кислоты предусматривает культивирование указанного штамма в подходящих условиях с последующим выделением фумаровой кислоты из культуральной жидкости. Группа изобретений обеспечивает высокую продукцию фумаровой кислоты. Коэффициент конверсии глюкозы в фумаровую кислоту при культивировании предложенного штамма составляет 1,31 моль/моль, что составляет 65,5% от теоретически возможного максимума. 2 1. Штамм бактерий Escherichia coli FUM1.0 - продуцент фумаровой кислоты, полученный путем инактивации генов ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, pflB, frdA, frdB, sdhA, sdhB, aceA, асеВ и ptsG, и усиления экспрессии генов galP и glk в штамме Escherichia coli K-12 MG1655. 2. Штамм бактерий Escherichia coli по п. 1, отличающийся тем, что экспрессия генов galP и glk усилена за счет замены в хромосоме штамма нуклеотидных последовательностей природных промоторов, контролирующих экспрессию генов galP и glk, на более сильные промоторы. 3. Способ получения фумаровой кислоты путем культивирования штамма по п. 1 в подходящих условиях с последующим выделением фумаровой кислоты из культуральной жидкости.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Группа изобретений относится к биотехнологии и представляет собой рекомбинантный штамм Escherichia coli ВКПМ В-11864, обладающий конститутивной аспартазной активностью и полученный путем введения в штамм E. coli ВКПМ 7188 плазмиды, содержащей ген aspA под контролем промотора pEftu из Corynebacterium glutamicum АТСС13032. Группа изобретений относится также к способу синтеза L-аспарагиновой кислоты, согласно которому фумарат аммония смешивают с суспензией биокатализатора, причем в качестве биокатализатора используют указанный рекомбинантный штамм. Группа изобретений позволяет получать L-аспарагиновую кислоту с высокой степенью эффективности. 1. Рекомбинантный штамм Escherichia coli ВКПМ В-11864, обладающий конститутивной аспартазной активностью и полученный путем введения в штамм E. coli ВКПМ 7188 плазмиды, содержащей ген aspA под контролем промотора pEftu из Corynebacterium glutamicum АТСС13032. 2. Способ синтеза L-аспарагиновой кислоты, согласно которому фумарат аммония смешивают с суспензией биокатализатора, причем в качестве биокатализатора используют рекомбинантный штамм по п. 1. 3. Способ по п. 2, в котором в качестве биокатализатора используют свободные или иммобилизованные клетки рекомбинантного штамма по п. 1.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)