Штаммы микроорганизмов

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложена рекомбинантная секретируемая термостабильная ?-глюканаза, включающая последовательность кодирующей части гена ?-глюканазы семейства 12 из штамма Thielavia terrestris ВКПМ F-144 и имеющая последовательность SEQ ID NO 2. Также предложен рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-4850, продуцирующий вышеуказанную ?-глюканазу и полученный путем введения кодирующей части гена ?-глюканазы из штамма Thielavia terrestris ВКПМ F-144, соответствующей последовательности SEQ ID NO 1 в штамм-реципиент Pichia pastoris Х33 в составе плазмиды pPIC-ThiTeEgh12. Также предложен способ микробиологического синтеза вышеуказанной ?-глюканазы, предусматривающий культивирование штамма Pichia pastoris ВКПМ Y-4850 в аэробных условиях в подходящей питательной среде с периодическим добавлением в качестве индуктора метанола до максимального накопления целевого продукта. Группа изобретений обеспечивает расширение арсенала рекомбинантных ?-глюканаз, штаммов-продуцентов и способов микробиологического синтеза рекомбинантных ?-глюканаз. 1. Рекомбинантная секретируемая термостабильная ?-глюканаза, включающая последовательность кодирующей части гена ?-глюканазы семейства 12 из штамма Thielavia terrestris ВКПМ F-144 и имеющая последовательность SEQ ID NO 2. 2. Рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-4850 - продуцент ?-глюканазы по п. 1, полученный путем введения кодирующей части гена ?-глюканазы из штамма Thielavia terrestris ВКПМ F-144, соответствующей последовательности SEQ ID NO 1 в штамм-реципиент Pichia pastoris Х33 в составе плазмиды pPIC-ThiTeEgh12. 3. Способ микробиологического синтеза ?-глюканазы по п. 1 путем культивирования штамма дрожжей Pichia pastoris по п. 2 в аэробных условиях в подходящей питательной среде с периодическим добавлением в качестве индуктора метанола до максимального накопления целевого продукта.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Изобретение относится к области биотехнологии и касается рекомбинантного штамма Escherichia coli ВКПМ В-11246 - продуцента гидролазы эфиров альфа-аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915 и способа микробиологического синтеза такой гидролазы. Представленный штамм сконструирован путем трансформации штамма-реципиента Escherichia coli BL21(DE3) плазмидной ДНК, содержащей кодирующую область гена aehR гидролазы эфиров альфа-аминокислот Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915 под контролем промотора Т7 и ген устойчивости к канамицину Kan гидролазы эфиров альфа-аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915. Представленный способ синтеза гидролазы эфиров альфа-аминокислот осуществляют путем культивирования штамма-продуцента Escherichia coli ВКПМ В-11246 с добавлением в состав среды канамицина и изопропил-?-D-тиогалактозида в качестве индуктора экспрессии получаемого продукта. Изобретения обеспечивают высокий уровень биосинтеза целевого продукта, что может быть использовано для разработки методов получения биокатализаторов процессов синтеза аминопенициллинов и аминоцефалоспоринов. 1. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli ВКПМ В-11246 - продуцент гидролазы эфиров альфа-аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915, полученный путем трансформации штамма-реципиента Escherichia coli BL21(DE3) плазмидной ДНК, соответствующей нуклеотидной последовательности SEQ ID NO 1, содержащей кодирующую область гена aehR гидролазы эфиров альфа-аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915 под контролем промотора Т7, а также ген устойчивости к канамицину Kan. 2. Способ микробиологического синтеза гидролазы эфиров альфа-аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915, предусматривающий культивирование бактерий, содержащих ген aehR из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915, в подходящей питательной среде, отличающийся тем, что в качестве продуцента используют рекомбинантный штамм по п.1, в состав среды включают канамицин, а экспрессию целевого продукта осуществляют добавлением изопропил-?-D-тиогалактозида в качестве индуктора.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU), Общество с ограниченной ответственностью "Инновации и высокие технологии МГУ" (ООО "Иннотех МГУ") (RU)

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии. Предлагается способ конструирования штаммов дрожжей - стабильных продуцентов гормона роста человека (соматотропина). Кроме того, предлагаются два штамма ВКПМ Y-3506 и ВКПМ Y-3507 - стабильных продуцента соматотропина человека. Штаммы микроорганизмов-продуценты были получены путем последовательной интеграции в геном реципиентного штамма экспрессионных плазмид. Каждая плазмида несет в своем составе ген соматотропина (GH1), слитый с лидерной последовательностью, под контролем промотора GAL1, а также один из генов URA3, LEU2, TRP1 и HIS3, комплементирующих ауксотрофные мутации штамма-реципиента. Продуктивность полученных штаммов составляет 100-130 мг соматотропина на 1 л среды. 3 н.п. ф-лы, 7 ил.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП ГосНИИгенетика) (RU)

Изобретение относится к биотехнологии. Штамм бактерий Rhodococcus erythropolis 37 ВКПМ Ac-1793 обладает ацилирующей активностью и способен синтезировать N-замещенные алифатические акриламиды. Способ предусматривает использование данного штамма в качестве биокатализатора в процессе синтеза из акриламида и первичных алифатических аминов N-замещенных алифатических акриламидов. Изобретение позволяет получать высокие выходы N-замещенных алифатических акриламидов. Выход N-изопропилакриламида составляет 11 г/л, N-диметиламинопропилакриламида - 5 г/л. 2 н.п. ф-лы.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП ГосНИИгенетика) (RU)

Изобретение относится к биотехнологии. Способ предусматривает культивирование клеток Escherichia coli, продуцирующих синтетазу цефалоспоринов-кислот. В качестве критериев выбора момента прекращения процесса биосинтеза фермента используют величину рН культуральной жидкости и константу распределения целевого фермента Красп=Абмк/Ар-р, где Абмк - ферментативная активность биомассы клеток (МЕ/г влажн.), а Ар-р - ферментативная активность надосадочной жидкости (МЕ/мл). Процесс биосинтеза синтетазы цефалоспоринов-кислот прекращают при Красп не менее 350 и значении рН 7,9?8,2. Полученную биомассу клеток в концентрации 100?150 мг сух./г полимеризационной смеси суспендируют в растворе акриламида и N,N'-метилен-бис-акриламида при весовом отношении 20:1. В течение 5?30 мин осуществляют модификацию клеток глутаровым альдегидом, взятым в относительной концентрации 1·10-3?9·10-3 ммоль/мг белка. Процесс полимеризации инициируют солью надсерной кислоты. Способ позволяет получить биокатализатор, обладающий высокими целевой активностью и стабильностью и не содержащий вымываемых при эксплуатации белков, загрязняющих целевой продукт биокаталитической трансформации. Синтетазная активность биокатализатора составляет 750-950 МЕ/г сух. 3 табл.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП ГосНИИгенетика) (RU), Сичуаньский индустриальный институт антибиотиков, Синофарм (СИИА) (CN)