|
№
|
||||||
|---|---|---|---|---|---|---|
|
71
|
Патент 2509154
|
Изобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии и представляет собой рекомбинантную плазмиду pHisTevTSIB0821 для экспрессии в клетках Escherichia coli пролидазы TSIB_0821 из археи Thermococcus sibiricus. Заявленная плазмида включает NdeI/SalI-фрагмент плазмиды pET-22b(+) (Novagen) и фрагмент ДНК размером 1196 пар оснований, содержащий слитый ген, состоящий из следующих структурных элементов: нуклеотидная последовательность, кодирующая шестигистидиновый таг, нуклеотидная последовательность, кодирующая сайт узнавания/расщепления протеазы TEV, и нуклеотидная последовательность гена TSIB_0821, соединенных так, чтобы при их биосинтезе в клетках Е. coli сохранялась непрерывная рамка считывания. Получен штамм Е. coli Rosetta(DE3), трансформированный указанной плазмидой, - продуцент химерного белка, включающего аминокислотную последовательность пролидазы TSIB_0821 слитую на N-конце с шестигистидиновым тагом и сайтом узнавания/расщепления протеазы TEV. Разработан способ выращивания и индукции штамма-продуцента и метод выделения и очистки из полученной биомассы функционально-активной рекомбинантной пролидазы TSIB_0821, включающий следующие технологические процессы: две металлоаффинные хроматографии, гель-фильтрацию, обработку TEV протеазой, диализ, концентрирование. Изобретение позволяет получить рекомбинантную пролидазу, максимально приближенную по структуре к ее природному аналогу с высоким и стабильным выходом, уровнем очистки и функциональной активности. 1. Плазмида pHisTevTSIB0821, определяющая синтез рекомбинантной пролидазы TSIB_0821, характеризующаяся наличием следующих фрагментов: NdeI/SalI-фрагмента, плазмиды pET-22b(+) (Novagen) размером 5365 п.о., NdeI/NcoI-фрагмента, кодирующего шестигистидиновый таг и сайт узнавания/расщепления протеазы TEV (Seq. 1), и NcoI/SalI-фрагмента, содержащего структурную часть гена TSIB_0821, соответствующую открытой рамке считывания 749419-750516 полного геномного сиквенса археи Thermococcus sibiricus MM 739 (gi:242397997), адаптированную по 5'- и 3'-концам сайтами рестриказ Ncol и Sail (Seq. 2), соединенных так, чтобы при их биосинтезе в клетках E.coli сохранялась непрерывная рамка считывания.
2. Штамм Е. coli Rosetta(DE3), трансформированный плазмидой pHisTevTSIB0821 по п.1, - индуцибельный продуцент химерного белка, включающего аминокислотную последовательность пролидазы TSIB_0821, слитую на N-конце с шестигистидиновым тагом и сайтом узнавания/расщепления протеазы TEV.
3. Способ получения рекомбинантной пролидазы TSIB_0821, характеризующийся тем, что после добавления индуктора экспрессии штамм-продуцент по п.2 инкубируют в жидкой питательной среде LB в течение 20 ч при 18°С, затем бактериальные клетки осаждают центрифугированием, суспензию клеток дезинтегрируют в буферном растворе, экстракт центрифугируют, а надосадочную жидкость помещают на колонку с металлоаффинной смолой, с которой после удаления продуктов неспецифического связывания элюируют целевой белок, который инкубируют с протеазой TEV, которую вместе c отщепленной ею аминокислотной последовательностью удаляют повторной металлохелатной хроматографией, далее целевой продукт концентрируют и финально доочищают гель-фильтрацией.
Основное назначение
Изобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии и представляет собой рекомбинантную плазмиду pHisTevTSIB0821 для экспрессии в клетках Escherichia coli пролидазы TSIB_0821 из археи Thermococcus sibiricus. Заявленная плазмида включает NdeI/SalI-фрагмент плазмиды pET-22b(+) (Novagen) и фрагмент ДНК размером 1196 пар оснований, содержащий слитый ген, состоящий из следующих структурных элементов: нуклеотидная последовательность, кодирующая шестигистидиновый таг, нуклеотидная последовательность, кодирующая сайт узнавания/расщепления протеазы TEV, и нуклеотидная последовательность гена TSIB_0821, соединенных так, чтобы при их биосинтезе в клетках Е. coli сохранялась непрерывная рамка считывания. Получен штамм Е. coli Rosetta(DE3), трансформированный указанной плазмидой, - продуцент химерного белка, включающего аминокислотную последовательность пролидазы TSIB_0821 слитую на N-конце с шестигистидиновым тагом и сайтом узнавания/расщепления протеазы TEV. Разработан способ выращивания и индукции штамма-продуцента и метод выделения и очистки из полученной биомассы функционально-активной рекомбинантной пролидазы TSIB_0821, включающий следующие технологические процессы: две металлоаффинные хроматографии, гель-фильтрацию, обработку TEV протеазой, диализ, концентрирование. Изобретение позволяет получить рекомбинантную пролидазу, максимально приближенную по структуре к ее природному аналогу с высоким и стабильным выходом, уровнем очистки и функциональной активности. 1. Плазмида pHisTevTSIB0821, определяющая синтез рекомбинантной пролидазы TSIB_0821, характеризующаяся наличием следующих фрагментов: NdeI/SalI-фрагмента, плазмиды pET-22b(+) (Novagen) размером 5365 п.о., NdeI/NcoI-фрагмента, кодирующего шестигистидиновый таг и сайт узнавания/расщепления протеазы TEV (Seq. 1), и NcoI/SalI-фрагмента, содержащего структурную часть гена TSIB_0821, соответствующую открытой рамке считывания 749419-750516 полного геномного сиквенса археи Thermococcus sibiricus MM 739 (gi:242397997), адаптированную по 5'- и 3'-концам сайтами рестриказ Ncol и Sail (Seq. 2), соединенных так, чтобы при их биосинтезе в клетках E.coli сохранялась непрерывная рамка считывания.
2. Штамм Е. coli Rosetta(DE3), трансформированный плазмидой pHisTevTSIB0821 по п.1, - индуцибельный продуцент химерного белка, включающего аминокислотную последовательность пролидазы TSIB_0821, слитую на N-конце с шестигистидиновым тагом и сайтом узнавания/расщепления протеазы TEV.
3. Способ получения рекомбинантной пролидазы TSIB_0821, характеризующийся тем, что после добавления индуктора экспрессии штамм-продуцент по п.2 инкубируют в жидкой питательной среде LB в течение 20 ч при 18°С, затем бактериальные клетки осаждают центрифугированием, суспензию клеток дезинтегрируют в буферном растворе, экстракт центрифугируют, а надосадочную жидкость помещают на колонку с металлоаффинной смолой, с которой после удаления продуктов неспецифического связывания элюируют целевой белок, который инкубируют с протеазой TEV, которую вместе c отщепленной ею аминокислотной последовательностью удаляют повторной металлохелатной хроматографией, далее целевой продукт концентрируют и финально доочищают гель-фильтрацией.
|
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
Основное назначение
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
|
1. Плазмида pHisTevTSIB0821, определяющая синтез рекомбинантной пролидазы TSIB_0821, характеризующаяся наличием следующих фрагментов: NdeI/SalI-фрагмента, плазмиды pET-22b(+) (Novagen) размером 5365 п.о., NdeI/NcoI-фрагмента, кодирующего шестигистидиновый таг и сайт узнавания/расщепления протеазы TEV (Seq. 1), и NcoI/SalI-фрагмента, содержащего структурную часть гена TSIB_0821, соответствующую открытой рамке считывания 749419-750516 полного геномного сиквенса археи Thermococcus sibiricus MM 739 (gi:242397997), адаптированную по 5'- и 3'-концам сайтами рестриказ Ncol и Sail (Seq. 2), соединенных так, чтобы при их биосинтезе в клетках E.coli сохранялась непрерывная рамка считывания.
2. Штамм Е. coli Rosetta(DE3), трансформированный плазмидой pHisTevTSIB0821 по п.1, - индуцибельный продуцент химерного белка, включающего аминокислотную последовательность пролидазы TSIB_0821, слитую на N-конце с шестигистидиновым тагом и сайтом узнавания/расщепления протеазы TEV.
3. Способ получения рекомбинантной пролидазы TSIB_0821, характеризующийся тем, что после добавления индуктора экспрессии штамм-продуцент по п.2 инкубируют в жидкой питательной среде LB в течение 20 ч при 18°С, затем бактериальные клетки осаждают центрифугированием, суспензию клеток дезинтегрируют в буферном растворе, экстракт центрифугируют, а надосадочную жидкость помещают на колонку с металлоаффинной смолой, с которой после удаления продуктов неспецифического связывания элюируют целевой белок, который инкубируют с протеазой TEV, которую вместе c отщепленной ею аминокислотной последовательностью удаляют повторной металлохелатной хроматографией, далее целевой продукт концентрируют и финально доочищают гель-фильтрацией.
Основное назначение
1. Плазмида pHisTevTSIB0821, определяющая синтез рекомбинантной пролидазы TSIB_0821, характеризующаяся наличием следующих фрагментов: NdeI/SalI-фрагмента, плазмиды pET-22b(+) (Novagen) размером 5365 п.о., NdeI/NcoI-фрагмента, кодирующего шестигистидиновый таг и сайт узнавания/расщепления протеазы TEV (Seq. 1), и NcoI/SalI-фрагмента, содержащего структурную часть гена TSIB_0821, соответствующую открытой рамке считывания 749419-750516 полного геномного сиквенса археи Thermococcus sibiricus MM 739 (gi:242397997), адаптированную по 5'- и 3'-концам сайтами рестриказ Ncol и Sail (Seq. 2), соединенных так, чтобы при их биосинтезе в клетках E.coli сохранялась непрерывная рамка считывания.
2. Штамм Е. coli Rosetta(DE3), трансформированный плазмидой pHisTevTSIB0821 по п.1, - индуцибельный продуцент химерного белка, включающего аминокислотную последовательность пролидазы TSIB_0821, слитую на N-конце с шестигистидиновым тагом и сайтом узнавания/расщепления протеазы TEV.
3. Способ получения рекомбинантной пролидазы TSIB_0821, характеризующийся тем, что после добавления индуктора экспрессии штамм-продуцент по п.2 инкубируют в жидкой питательной среде LB в течение 20 ч при 18°С, затем бактериальные клетки осаждают центрифугированием, суспензию клеток дезинтегрируют в буферном растворе, экстракт центрифугируют, а надосадочную жидкость помещают на колонку с металлоаффинной смолой, с которой после удаления продуктов неспецифического связывания элюируют целевой белок, который инкубируют с протеазой TEV, которую вместе c отщепленной ею аминокислотной последовательностью удаляют повторной металлохелатной хроматографией, далее целевой продукт концентрируют и финально доочищают гель-фильтрацией.
|
||
|
72
|
2522479
|
Изобретение относится к области биотехнологии и касается применения штамма дрожжей Komagataella pastoris ВКПМ Y-727. Охарактеризовано применение штамма дрожжей Komagataella pastoris ВКПМ Y-727 в качестве реципиента для конструирования продуцентов целевого белка, необязательно включающее введение в него мутаций, обеспечивающих использование ауксотрофных селективных маркеров. Представленное решение может быть применимо при получении рекомбинантных белков без использования метанола в качестве индуктора экспрессии генов.
Основное назначение
Изобретение относится к области биотехнологии и касается применения штамма дрожжей Komagataella pastoris ВКПМ Y-727. Охарактеризовано применение штамма дрожжей Komagataella pastoris ВКПМ Y-727 в качестве реципиента для конструирования продуцентов целевого белка, необязательно включающее введение в него мутаций, обеспечивающих использование ауксотрофных селективных маркеров. Представленное решение может быть применимо при получении рекомбинантных белков без использования метанола в качестве индуктора экспрессии генов.
|
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
Основное назначение
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
|
Применение штамма дрожжей Komagataella pastoris ВКПМ Y-727 в качестве реципиента для конструирования продуцентов целевого белка, необязательно включающее введение в него мутаций, обеспечивающих использование ауксотрофных селективных маркеров.
Основное назначение
Применение штамма дрожжей Komagataella pastoris ВКПМ Y-727 в качестве реципиента для конструирования продуцентов целевого белка, необязательно включающее введение в него мутаций, обеспечивающих использование ауксотрофных селективных маркеров.
|
||
|
73
|
Патент 2642260
|
Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложены рекомбинантный модифицированный глюкагоноподобный пептид-1 человека (рмГПП-1), способ его получения и штамм-продуцент E.coli ВКПМ В-12555. рмГПП-1 имеет последовательность SEQ ID NO 1. рмГПП-1 получают путем культивирования рекомбинантного штамма-продуцента E.coli ВКПМ В-12555 для получения предшественника пептида рмГПП-1 с последующим выделением полученного предшественника, его автокаталитическим расщеплением и очисткой целевого полипептида. На мышиной модели показано, что при подкожном или внутримышечном применении рмГПП-1 имеет показатели сахаропонижающей активности и продолжительности действия, сходные с показателями коммерческого препарата «Ликсумия», получаемого с использованием химического синтеза, и на протяжении минимум 3 ч после введения способен эффективно снижать уровень глюкозы в крови практически в два раза по сравнению с контролем. Штамм E. coli ВКПМ В-12555 позволяет осуществлять биосинтез предшественника рмГПП-1 на уровне 40% от суммарного белка клеток, что соответствует биосинтезу рмГПП-1 на уровне 13% от суммарного белка клеток. 1. Рекомбинантный глюкагоноподобный пептид-1 человека для понижения уровня сахара в крови, имеющий последовательность SEQ ID NO 1.
2. Рекомбинантный штамм-продуцент Escherichia coli ВКПМ В-12555, используемый для получения пептида по п. 1 и являющийся продуцентом предшественника пептида по п. 1.
3. Способ получения рекомбинантного глюкагоноподобного пептида-1 человека по п. 1 путем культивирования рекомбинантного штамма-продуцента по п. 2 для получения предшественника пептида по п. 1 с последующим выделением полученного предшественника, его автокаталитическим расщеплением и очисткой целевого полипептида.
Основное назначение
Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложены рекомбинантный модифицированный глюкагоноподобный пептид-1 человека (рмГПП-1), способ его получения и штамм-продуцент E.coli ВКПМ В-12555. рмГПП-1 имеет последовательность SEQ ID NO 1. рмГПП-1 получают путем культивирования рекомбинантного штамма-продуцента E.coli ВКПМ В-12555 для получения предшественника пептида рмГПП-1 с последующим выделением полученного предшественника, его автокаталитическим расщеплением и очисткой целевого полипептида. На мышиной модели показано, что при подкожном или внутримышечном применении рмГПП-1 имеет показатели сахаропонижающей активности и продолжительности действия, сходные с показателями коммерческого препарата «Ликсумия», получаемого с использованием химического синтеза, и на протяжении минимум 3 ч после введения способен эффективно снижать уровень глюкозы в крови практически в два раза по сравнению с контролем. Штамм E. coli ВКПМ В-12555 позволяет осуществлять биосинтез предшественника рмГПП-1 на уровне 40% от суммарного белка клеток, что соответствует биосинтезу рмГПП-1 на уровне 13% от суммарного белка клеток. 1. Рекомбинантный глюкагоноподобный пептид-1 человека для понижения уровня сахара в крови, имеющий последовательность SEQ ID NO 1.
2. Рекомбинантный штамм-продуцент Escherichia coli ВКПМ В-12555, используемый для получения пептида по п. 1 и являющийся продуцентом предшественника пептида по п. 1.
3. Способ получения рекомбинантного глюкагоноподобного пептида-1 человека по п. 1 путем культивирования рекомбинантного штамма-продуцента по п. 2 для получения предшественника пептида по п. 1 с последующим выделением полученного предшественника, его автокаталитическим расщеплением и очисткой целевого полипептида.
|
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)
Основное назначение
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)
|
1. Рекомбинантный глюкагоноподобный пептид-1 человека для понижения уровня сахара в крови, имеющий последовательность SEQ ID NO 1.
2. Рекомбинантный штамм-продуцент Escherichia coli ВКПМ В-12555, используемый для получения пептида по п. 1 и являющийся продуцентом предшественника пептида по п. 1.
3. Способ получения рекомбинантного глюкагоноподобного пептида-1 человека по п. 1 путем культивирования рекомбинантного штамма-продуцента по п. 2 для получения предшественника пептида по п. 1 с последующим выделением полученного предшественника, его автокаталитическим расщеплением и очисткой целевого полипептида.
Основное назначение
1. Рекомбинантный глюкагоноподобный пептид-1 человека для понижения уровня сахара в крови, имеющий последовательность SEQ ID NO 1.
2. Рекомбинантный штамм-продуцент Escherichia coli ВКПМ В-12555, используемый для получения пептида по п. 1 и являющийся продуцентом предшественника пептида по п. 1.
3. Способ получения рекомбинантного глюкагоноподобного пептида-1 человека по п. 1 путем культивирования рекомбинантного штамма-продуцента по п. 2 для получения предшественника пептида по п. 1 с последующим выделением полученного предшественника, его автокаталитическим расщеплением и очисткой целевого полипептида.
|
||
|
74
|
Патент 2815837
|
Изобретение относится к биотехнологии. Предложена мутантная ксилоглюканаза AsCeGH12b-mut, имеющая аминокислотную последовательность SEQ ID NO 1, которая соответствует аминокислотной последовательности ксилоглюканазы семейства 12 дикого типа из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612, с заменой природного остатка тирозина в положении 37 остатком валина, и обладающая повышенными термостабильностью и температурным максимумом активности по сравнению с ферментом дикого типа. Также предложены рекомбинантный штамм Escherichia coli ВКПМ В-14321, продуцирующий указанную ксилоглюканазу AsCeGH12b-mut, и способ микробиологического синтеза указанной ксилоглюканазы с использованием указанного штамма. Изобретение обеспечивает расширение арсенала рекомбинантных ксилоглюканаз, штаммов-продуцентов и способов микробиологического синтеза рекомбинантных ксилоглюканаз. 3 н.п. ф-лы, 2 ил., 3 пр.
Основное назначение
Изобретение относится к биотехнологии. Предложена мутантная ксилоглюканаза AsCeGH12b-mut, имеющая аминокислотную последовательность SEQ ID NO 1, которая соответствует аминокислотной последовательности ксилоглюканазы семейства 12 дикого типа из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612, с заменой природного остатка тирозина в положении 37 остатком валина, и обладающая повышенными термостабильностью и температурным максимумом активности по сравнению с ферментом дикого типа. Также предложены рекомбинантный штамм Escherichia coli ВКПМ В-14321, продуцирующий указанную ксилоглюканазу AsCeGH12b-mut, и способ микробиологического синтеза указанной ксилоглюканазы с использованием указанного штамма. Изобретение обеспечивает расширение арсенала рекомбинантных ксилоглюканаз, штаммов-продуцентов и способов микробиологического синтеза рекомбинантных ксилоглюканаз. 3 н.п. ф-лы, 2 ил., 3 пр.
|
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
Основное назначение
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
|
Изобретение относится к биотехнологии. Предложена мутантная ксилоглюканаза AsCeGH12b-mut, имеющая аминокислотную последовательность SEQ ID NO 1, которая соответствует аминокислотной последовательности ксилоглюканазы семейства 12 дикого типа из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612, с заменой природного остатка тирозина в положении 37 остатком валина, и обладающая повышенными термостабильностью и температурным максимумом активности по сравнению с ферментом дикого типа. Также предложены рекомбинантный штамм Escherichia coli ВКПМ В-14321, продуцирующий указанную ксилоглюканазу AsCeGH12b-mut, и способ микробиологического синтеза указанной ксилоглюканазы с использованием указанного штамма. Изобретение обеспечивает расширение арсенала рекомбинантных ксилоглюканаз, штаммов-продуцентов и способов микробиологического синтеза рекомбинантных ксилоглюканаз. 3 н.п. ф-лы, 2 ил., 3 пр.
Основное назначение
Изобретение относится к биотехнологии. Предложена мутантная ксилоглюканаза AsCeGH12b-mut, имеющая аминокислотную последовательность SEQ ID NO 1, которая соответствует аминокислотной последовательности ксилоглюканазы семейства 12 дикого типа из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612, с заменой природного остатка тирозина в положении 37 остатком валина, и обладающая повышенными термостабильностью и температурным максимумом активности по сравнению с ферментом дикого типа. Также предложены рекомбинантный штамм Escherichia coli ВКПМ В-14321, продуцирующий указанную ксилоглюканазу AsCeGH12b-mut, и способ микробиологического синтеза указанной ксилоглюканазы с использованием указанного штамма. Изобретение обеспечивает расширение арсенала рекомбинантных ксилоглюканаз, штаммов-продуцентов и способов микробиологического синтеза рекомбинантных ксилоглюканаз. 3 н.п. ф-лы, 2 ил., 3 пр.
|
||
|
75
|
2854312
|
Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложена рекомбинантная мутантная ксилоглюканаза AsCeGH12b-m2, имеющая аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, которая соответствует аминокислотной последовательности ксилоглюканазы семейства 12 из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612 с заменой природного остатка лейцина в положении 18 остатком изолейцина и остатка тирозина в положении 37 остатком валина, обеспечивающим повышение термостабильности модифицированного фермента по сравнению с ферментом дикого типа. Также предложен рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-5262 - продуцент секретируемой ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2, имеющей SEQ ID NO: 1 и кодируемой геном AsCeGH12b-m2, имеющим SEQ ID NO: 2. Разработан способ микробиологического синтеза ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2, предусматривающий культивирование указанного штамма в аэробных условиях в подходящей питательной среде. Изобретение обеспечивает высокий уровень продукции ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2 с повышенной термостабильностью, а также эффективное снижение вязкости растворов ксилоглюкана. 3 н.п. ф-лы, 1 ил., 3 пр.
Основное назначение
Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложена рекомбинантная мутантная ксилоглюканаза AsCeGH12b-m2, имеющая аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, которая соответствует аминокислотной последовательности ксилоглюканазы семейства 12 из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612 с заменой природного остатка лейцина в положении 18 остатком изолейцина и остатка тирозина в положении 37 остатком валина, обеспечивающим повышение термостабильности модифицированного фермента по сравнению с ферментом дикого типа. Также предложен рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-5262 - продуцент секретируемой ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2, имеющей SEQ ID NO: 1 и кодируемой геном AsCeGH12b-m2, имеющим SEQ ID NO: 2. Разработан способ микробиологического синтеза ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2, предусматривающий культивирование указанного штамма в аэробных условиях в подходящей питательной среде. Изобретение обеспечивает высокий уровень продукции ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2 с повышенной термостабильностью, а также эффективное снижение вязкости растворов ксилоглюкана. 3 н.п. ф-лы, 1 ил., 3 пр.
|
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный исследовательский центр «Курчатовский институт» (RU)
Основное назначение
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный исследовательский центр «Курчатовский институт» (RU)
|
"1. Рекомбинантная мутантная ксилоглюканаза AsCeGH12b-m2, имеющая аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, которая соответствует аминокислотной последовательности ксилоглюканазы семейства 12 из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612 с заменой природного остатка лейцина в положении 18 остатком изолейцина и остатка тирозина в положении 37 остатком валина, обеспечивающим повышение термостабильности модифицированного фермента по сравнению с ферментом дикого типа.
2. Рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-5262 - продуцент секретируемой ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2 по п. 1, имеющей SEQ ID NO: 1 и кодируемой геном AsCeGH12b-m2, имеющим SEQ ID NO: 2.
3. Способ микробиологического синтеза рекомбинантной мутантной ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2 по п. 1, предусматривающий культивирование рекомбинантного штамма Pichia pastoris по п. 2 в аэробных условиях в подходящей питательной среде.
Основное назначение
"1. Рекомбинантная мутантная ксилоглюканаза AsCeGH12b-m2, имеющая аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, которая соответствует аминокислотной последовательности ксилоглюканазы семейства 12 из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612 с заменой природного остатка лейцина в положении 18 остатком изолейцина и остатка тирозина в положении 37 остатком валина, обеспечивающим повышение термостабильности модифицированного фермента по сравнению с ферментом дикого типа.
2. Рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-5262 - продуцент секретируемой ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2 по п. 1, имеющей SEQ ID NO: 1 и кодируемой геном AsCeGH12b-m2, имеющим SEQ ID NO: 2.
3. Способ микробиологического синтеза рекомбинантной мутантной ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2 по п. 1, предусматривающий культивирование рекомбинантного штамма Pichia pastoris по п. 2 в аэробных условиях в подходящей питательной среде.
|
||
|
76
|
2854312
|
Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложена рекомбинантная мутантная ксилоглюканаза AsCeGH12b-m2, имеющая аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, которая соответствует аминокислотной последовательности ксилоглюканазы семейства 12 из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612 с заменой природного остатка лейцина в положении 18 остатком изолейцина и остатка тирозина в положении 37 остатком валина, обеспечивающим повышение термостабильности модифицированного фермента по сравнению с ферментом дикого типа. Также предложен рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-5262 - продуцент секретируемой ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2, имеющей SEQ ID NO: 1 и кодируемой геном AsCeGH12b-m2, имеющим SEQ ID NO: 2. Разработан способ микробиологического синтеза ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2, предусматривающий культивирование указанного штамма в аэробных условиях в подходящей питательной среде. Изобретение обеспечивает высокий уровень продукции ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2 с повышенной термостабильностью, а также эффективное снижение вязкости растворов ксилоглюкана.
Основное назначение
Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложена рекомбинантная мутантная ксилоглюканаза AsCeGH12b-m2, имеющая аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, которая соответствует аминокислотной последовательности ксилоглюканазы семейства 12 из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612 с заменой природного остатка лейцина в положении 18 остатком изолейцина и остатка тирозина в положении 37 остатком валина, обеспечивающим повышение термостабильности модифицированного фермента по сравнению с ферментом дикого типа. Также предложен рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-5262 - продуцент секретируемой ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2, имеющей SEQ ID NO: 1 и кодируемой геном AsCeGH12b-m2, имеющим SEQ ID NO: 2. Разработан способ микробиологического синтеза ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2, предусматривающий культивирование указанного штамма в аэробных условиях в подходящей питательной среде. Изобретение обеспечивает высокий уровень продукции ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2 с повышенной термостабильностью, а также эффективное снижение вязкости растворов ксилоглюкана.
|
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
Основное назначение
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
|
Рекомбинантная мутантная ксилоглюканаза AsCeGH12b-m2, имеющая аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, которая соответствует аминокислотной последовательности ксилоглюканазы семейства 12 из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612 с заменой природного остатка лейцина в положении 18 остатком изолейцина и остатка тирозина в положении 37 остатком валина, обеспечивающим повышение термостабильности модифицированного фермента по сравнению с ферментом дикого типа.
2. Рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-5262 - продуцент секретируемой ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2 по п. 1, имеющей SEQ ID NO: 1 и кодируемой геном AsCeGH12b-m2, имеющим SEQ ID NO: 2.
3. Способ микробиологического синтеза рекомбинантной мутантной ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2 по п. 1, предусматривающий культивирование рекомбинантного штамма Pichia pastoris по п. 2 в аэробных условиях в подходящей питательной среде.
Основное назначение
Рекомбинантная мутантная ксилоглюканаза AsCeGH12b-m2, имеющая аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, которая соответствует аминокислотной последовательности ксилоглюканазы семейства 12 из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612 с заменой природного остатка лейцина в положении 18 остатком изолейцина и остатка тирозина в положении 37 остатком валина, обеспечивающим повышение термостабильности модифицированного фермента по сравнению с ферментом дикого типа.
2. Рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-5262 - продуцент секретируемой ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2 по п. 1, имеющей SEQ ID NO: 1 и кодируемой геном AsCeGH12b-m2, имеющим SEQ ID NO: 2.
3. Способ микробиологического синтеза рекомбинантной мутантной ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2 по п. 1, предусматривающий культивирование рекомбинантного штамма Pichia pastoris по п. 2 в аэробных условиях в подходящей питательной среде.
|
||
|
77
|
Патент 2827573
|
Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен мутантный штамм Schizosaccharomyces pombe ВКПМ Y-4539 с делетированными генами URA4, PDC1, PDC3 и PDC4 в качестве реципиента для конструирования продуцентов молочной кислоты. Также предложены трансформант дрожжей Schizosaccharomyces pombe и штамм дрожжей Schizosaccharomyces pombe ВКПМ Y-5151, являющиеся продуцентами D-молочной кислоты и имеющие делетированные гены PDC1, PDC3, PDC4 и введенные ген D-LDH D-лактатдегидрогеназы из Lactobacillus plantarum, транскрипция которого находится под контролем промотора pHsp9, ген D-LDH D-лактатдегидрогеназы из Lactobacillus delbruecki, транскрипция которого находится под контролем промотора pADH, и ген урацила URA4. Изобретение обеспечивает расширение арсенала рекомбинантных микроорганизмов-реципиентов для конструирования продуцентов молочной кислоты и расширение арсенала микроорганизмов-продуцентов молочной кислоты. 3 н.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 6 пр.
Основное назначение
Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен мутантный штамм Schizosaccharomyces pombe ВКПМ Y-4539 с делетированными генами URA4, PDC1, PDC3 и PDC4 в качестве реципиента для конструирования продуцентов молочной кислоты. Также предложены трансформант дрожжей Schizosaccharomyces pombe и штамм дрожжей Schizosaccharomyces pombe ВКПМ Y-5151, являющиеся продуцентами D-молочной кислоты и имеющие делетированные гены PDC1, PDC3, PDC4 и введенные ген D-LDH D-лактатдегидрогеназы из Lactobacillus plantarum, транскрипция которого находится под контролем промотора pHsp9, ген D-LDH D-лактатдегидрогеназы из Lactobacillus delbruecki, транскрипция которого находится под контролем промотора pADH, и ген урацила URA4. Изобретение обеспечивает расширение арсенала рекомбинантных микроорганизмов-реципиентов для конструирования продуцентов молочной кислоты и расширение арсенала микроорганизмов-продуцентов молочной кислоты. 3 н.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 6 пр.
|
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный исследовательский центр «Курчатовский институт» (RU)
Основное назначение
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный исследовательский центр «Курчатовский институт» (RU)
|
Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен мутантный штамм Schizosaccharomyces pombe ВКПМ Y-4539 с делетированными генами URA4, PDC1, PDC3 и PDC4 в качестве реципиента для конструирования продуцентов молочной кислоты. Также предложены трансформант дрожжей Schizosaccharomyces pombe и штамм дрожжей Schizosaccharomyces pombe ВКПМ Y-5151, являющиеся продуцентами D-молочной кислоты и имеющие делетированные гены PDC1, PDC3, PDC4 и введенные ген D-LDH D-лактатдегидрогеназы из Lactobacillus plantarum, транскрипция которого находится под контролем промотора pHsp9, ген D-LDH D-лактатдегидрогеназы из Lactobacillus delbruecki, транскрипция которого находится под контролем промотора pADH, и ген урацила URA4. Изобретение обеспечивает расширение арсенала рекомбинантных микроорганизмов-реципиентов для конструирования продуцентов молочной кислоты и расширение арсенала микроорганизмов-продуцентов молочной кислоты. 3 н.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 6 пр.
Основное назначение
Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен мутантный штамм Schizosaccharomyces pombe ВКПМ Y-4539 с делетированными генами URA4, PDC1, PDC3 и PDC4 в качестве реципиента для конструирования продуцентов молочной кислоты. Также предложены трансформант дрожжей Schizosaccharomyces pombe и штамм дрожжей Schizosaccharomyces pombe ВКПМ Y-5151, являющиеся продуцентами D-молочной кислоты и имеющие делетированные гены PDC1, PDC3, PDC4 и введенные ген D-LDH D-лактатдегидрогеназы из Lactobacillus plantarum, транскрипция которого находится под контролем промотора pHsp9, ген D-LDH D-лактатдегидрогеназы из Lactobacillus delbruecki, транскрипция которого находится под контролем промотора pADH, и ген урацила URA4. Изобретение обеспечивает расширение арсенала рекомбинантных микроорганизмов-реципиентов для конструирования продуцентов молочной кислоты и расширение арсенала микроорганизмов-продуцентов молочной кислоты. 3 н.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 6 пр.
|
||
|
78
|
Патент 2701502
|
Группа изобретений относится к биотехнологии и включает кристаллообразующий штамм бактерий Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 и варианты его применения. Предлагаемый штамм является спорообразующим и обладает широким спектром антагонистической активности против различных видов организмов, что позволяет использовать его как эффективный биоцид. При этом данный штамм может быть применен в качестве биоцидного средства разной направленности. Возможны следующие виды применения - в качестве фунгицидного средства для борьбы с фитопатогенными микроскопическими грибами, в качестве альгицидного средства для борьбы с сине-зелёными и зелёными микроводорослями, в качестве инсектицидного средства против личинок комаров отряда Diptera: Anopheles stephensi, Aedes aegipti, Culex pipiens, в качестве средства, обладающего способностью подавлять патогенные бактерии. Уровень биоцидной активности заявляемого штамма достаточно высок, что позволит производить эффективные биоцидные препараты. 1. Штамм бактерий Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186, обладающий широким спектром антагонистической активности.
2. Применение штамма Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 в качестве фунгицидного средства для борьбы с фитопатогенными микроскопическими грибами.
3. Применение штамма Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 в качестве альгицидного средства для борьбы с сине-зелеными и зелеными микроводорослями.
4. Применение штамма Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 в качестве инсектицидного средства против личинок комаров отряда Diptera: Anopheles stephensi, Aedes aegypti и Culex pipiens.
5. Применение штамма Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 в качестве средства, обладающего способностью подавлять вирулентные свойства патогенных бактерий.
Основное назначение
Группа изобретений относится к биотехнологии и включает кристаллообразующий штамм бактерий Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 и варианты его применения. Предлагаемый штамм является спорообразующим и обладает широким спектром антагонистической активности против различных видов организмов, что позволяет использовать его как эффективный биоцид. При этом данный штамм может быть применен в качестве биоцидного средства разной направленности. Возможны следующие виды применения - в качестве фунгицидного средства для борьбы с фитопатогенными микроскопическими грибами, в качестве альгицидного средства для борьбы с сине-зелёными и зелёными микроводорослями, в качестве инсектицидного средства против личинок комаров отряда Diptera: Anopheles stephensi, Aedes aegipti, Culex pipiens, в качестве средства, обладающего способностью подавлять патогенные бактерии. Уровень биоцидной активности заявляемого штамма достаточно высок, что позволит производить эффективные биоцидные препараты. 1. Штамм бактерий Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186, обладающий широким спектром антагонистической активности.
2. Применение штамма Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 в качестве фунгицидного средства для борьбы с фитопатогенными микроскопическими грибами.
3. Применение штамма Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 в качестве альгицидного средства для борьбы с сине-зелеными и зелеными микроводорослями.
4. Применение штамма Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 в качестве инсектицидного средства против личинок комаров отряда Diptera: Anopheles stephensi, Aedes aegypti и Culex pipiens.
5. Применение штамма Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 в качестве средства, обладающего способностью подавлять вирулентные свойства патогенных бактерий.
|
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)
Основное назначение
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)
|
1. Штамм бактерий Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186, обладающий широким спектром антагонистической активности.
2. Применение штамма Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 в качестве фунгицидного средства для борьбы с фитопатогенными микроскопическими грибами.
3. Применение штамма Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 в качестве альгицидного средства для борьбы с сине-зелеными и зелеными микроводорослями.
4. Применение штамма Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 в качестве инсектицидного средства против личинок комаров отряда Diptera: Anopheles stephensi, Aedes aegypti и Culex pipiens.
5. Применение штамма Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 в качестве средства, обладающего способностью подавлять вирулентные свойства патогенных бактерий.
Основное назначение
1. Штамм бактерий Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186, обладающий широким спектром антагонистической активности.
2. Применение штамма Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 в качестве фунгицидного средства для борьбы с фитопатогенными микроскопическими грибами.
3. Применение штамма Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 в качестве альгицидного средства для борьбы с сине-зелеными и зелеными микроводорослями.
4. Применение штамма Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 в качестве инсектицидного средства против личинок комаров отряда Diptera: Anopheles stephensi, Aedes aegypti и Culex pipiens.
5. Применение штамма Brevibacillus laterosporus ВКПМ В-13186 в качестве средства, обладающего способностью подавлять вирулентные свойства патогенных бактерий.
|
||
|
79
|
2515913
|
Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для получения рекомбинантного интерферона альфа-2 человека. Гибридные белки GFN80 и GFN100 конструируют на основе рекомбинантныго интерферона альфа-2 человека, слитого с N-конца с аминокислотной последовательностью полипептида S(G4S)16 или S(G4S)20 соответственно. Рекомбинантным путем получают Штаммы микроорганизмов продуценты Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3927 и Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3928. Штаммы микроорганизмов используют в способе получения гибридного белка GFN80 и GFN100, который предусматривает культивирование в подходящих условиях дрожжевых клеток, трансформированных вектором экспрессии, который содержит область инициации репликации эндогенной 2-мкм плазмиды дрожжей Saccharomyces cerevisiae, а также промотор GAL1 дрожжей, контролирующий экспрессию гена, включающего последовательность ДНК SEQ ID NO:1 или SEQ ID NO:2, соответственно, с последующим выделением гибридного белка из культуральной жидкости. Изобретение позволяет получить гибридный рекомбинантный интерферон альфа-2 человека с пролонгированным действием в организме животных.
Основное назначение
Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для получения рекомбинантного интерферона альфа-2 человека. Гибридные белки GFN80 и GFN100 конструируют на основе рекомбинантныго интерферона альфа-2 человека, слитого с N-конца с аминокислотной последовательностью полипептида S(G4S)16 или S(G4S)20 соответственно. Рекомбинантным путем получают Штаммы микроорганизмов продуценты Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3927 и Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3928. Штаммы микроорганизмов используют в способе получения гибридного белка GFN80 и GFN100, который предусматривает культивирование в подходящих условиях дрожжевых клеток, трансформированных вектором экспрессии, который содержит область инициации репликации эндогенной 2-мкм плазмиды дрожжей Saccharomyces cerevisiae, а также промотор GAL1 дрожжей, контролирующий экспрессию гена, включающего последовательность ДНК SEQ ID NO:1 или SEQ ID NO:2, соответственно, с последующим выделением гибридного белка из культуральной жидкости. Изобретение позволяет получить гибридный рекомбинантный интерферон альфа-2 человека с пролонгированным действием в организме животных.
|
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
Основное назначение
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
|
1. Гибридный белок GFN80, обладающий пролонгированным действием и представляющий собой рекомбинантный интерферон альфа-2 человека, слитый с N-конца с аминокислотной последовательностью полипептида S(G4S)16.
2. Гибридный белок GFN100, обладающий пролонгированным действием и представляющий собой рекомбинантный интерферон альфа-2 человека, слитый с N-конца с аминокислотной последовательностью полипептида S(G4S)20.
3. Способ получения гибридного белка по п.1 или 2 путем культивирования в подходящих условиях дрожжей Saccharomyces cerevisiae, трансформированных вектором экспрессии, который содержит область инициации репликации эндогенной 2-мкм плазмиды дрожжей Saccharomyces cerevisiae, а также промотор GAL1 дрожжей, контролирующий экспрессию гена, включающего последовательность ДНК SEQ ID NO:1 или SEQ ID NO:2, соответственно, с последующим выделением гибридного белка из культуральной жидкости.
4. Штамм Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3927, предназначенный для осуществления способа по п.3 и полученный путем введения нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:1 в составе плазмиды р71-81 в клетки штамма-реципиента, являющегося бесплазмидным производным штамма Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3550.
5. Штамм Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3928, предназначенный для осуществления способа по п.3 и полученный путем введения нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:2 в составе плазмиды р71-82 в клетки штамма-реципиента, являющегося бесплазмидным производным штамма Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3550
Основное назначение
1. Гибридный белок GFN80, обладающий пролонгированным действием и представляющий собой рекомбинантный интерферон альфа-2 человека, слитый с N-конца с аминокислотной последовательностью полипептида S(G4S)16.
2. Гибридный белок GFN100, обладающий пролонгированным действием и представляющий собой рекомбинантный интерферон альфа-2 человека, слитый с N-конца с аминокислотной последовательностью полипептида S(G4S)20.
3. Способ получения гибридного белка по п.1 или 2 путем культивирования в подходящих условиях дрожжей Saccharomyces cerevisiae, трансформированных вектором экспрессии, который содержит область инициации репликации эндогенной 2-мкм плазмиды дрожжей Saccharomyces cerevisiae, а также промотор GAL1 дрожжей, контролирующий экспрессию гена, включающего последовательность ДНК SEQ ID NO:1 или SEQ ID NO:2, соответственно, с последующим выделением гибридного белка из культуральной жидкости.
4. Штамм Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3927, предназначенный для осуществления способа по п.3 и полученный путем введения нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:1 в составе плазмиды р71-81 в клетки штамма-реципиента, являющегося бесплазмидным производным штамма Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3550.
5. Штамм Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3928, предназначенный для осуществления способа по п.3 и полученный путем введения нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:2 в составе плазмиды р71-82 в клетки штамма-реципиента, являющегося бесплазмидным производным штамма Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3550
|
||
|
80
|
2562166
|
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой гибридный белок на основе мутантной рекомбинантной L-аспарагиназы бактерий Wolinella succinogenes с пониженной глутаминазной активностью и повышенной устойчивостью к действию трипсина, слитой с N-концевой аминокислотной последовательностью гепарин-связывающего пептида. Изобретение относится также к штаммам-продуцентам и к способу получения этого гибридного белка. Изобретение позволяет расширить ассортимент гибридных белков на основе аспарагиназы, обладающих противоопухолевой активностью.
Основное назначение
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой гибридный белок на основе мутантной рекомбинантной L-аспарагиназы бактерий Wolinella succinogenes с пониженной глутаминазной активностью и повышенной устойчивостью к действию трипсина, слитой с N-концевой аминокислотной последовательностью гепарин-связывающего пептида. Изобретение относится также к штаммам-продуцентам и к способу получения этого гибридного белка. Изобретение позволяет расширить ассортимент гибридных белков на основе аспарагиназы, обладающих противоопухолевой активностью.
|
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
Основное назначение
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
|
1. Гибридный белок, обладающий противоопухолевой активностью и заключающий в своем составе аминокислотную последовательность мутантной L-аспарагиназы бактерий Wolinella succinogenes, в которой аминокислотный остаток валина в положении 23 природной последовательности заменен на аминокислотный остаток глутамина, а аминокислотный остаток лизина в положении 24 природной последовательности заменен на остаток треонина, слитую с аминокислотной последовательностью гепарин-связывающего пептида НВ1, где гибридный белок имеет последовательность, указанную в SEQ ID NO: 3, или последовательность, указанную в положениях 161-508 SEQ ID NO: 1.
2. Штамм Escherichia coli ECR-89 - продуцент гибридного белка по п. 1, имеющего последовательность SEQ ID NO: 3, полученный путем трансформации реципиентного штамма E. coli BL21(DE3) плазмидой pET28-Was89, сконструированной на основе вектора pET28b(+) и содержащей структурный ген гибридного белка, имеющего последовательность SEQ ID NO: 3.
3. Штамм Escherichia coli ВКПМ В-11955 - продуцент гибридного белка по п. 1, имеющего последовательность, указанную в положениях 161-508 SEQ ID NO: 1.
4. Способ получения гибридного белка по п. 1, имеющего последовательность, указанную в положениях 161-508 SEQ ID NO: 1, путем культивирования штамма по п. 3 в условиях, обеспечивающих рост клеток этого штамма и биосинтез гибридного белка, с последующим отделением полученной клеточной биомассы и выделением из нее гибридного белка в условиях, обеспечивающих перевод гибридного белка либо во фракцию растворимых клеточных белков, либо во фракцию нерастворимых клеточных белков, и дальнейшей очисткой гибридного белка из белоксодержащей фракции с использованием методов ионообменной хроматографии и ультрафильтрации.
Основное назначение
1. Гибридный белок, обладающий противоопухолевой активностью и заключающий в своем составе аминокислотную последовательность мутантной L-аспарагиназы бактерий Wolinella succinogenes, в которой аминокислотный остаток валина в положении 23 природной последовательности заменен на аминокислотный остаток глутамина, а аминокислотный остаток лизина в положении 24 природной последовательности заменен на остаток треонина, слитую с аминокислотной последовательностью гепарин-связывающего пептида НВ1, где гибридный белок имеет последовательность, указанную в SEQ ID NO: 3, или последовательность, указанную в положениях 161-508 SEQ ID NO: 1.
2. Штамм Escherichia coli ECR-89 - продуцент гибридного белка по п. 1, имеющего последовательность SEQ ID NO: 3, полученный путем трансформации реципиентного штамма E. coli BL21(DE3) плазмидой pET28-Was89, сконструированной на основе вектора pET28b(+) и содержащей структурный ген гибридного белка, имеющего последовательность SEQ ID NO: 3.
3. Штамм Escherichia coli ВКПМ В-11955 - продуцент гибридного белка по п. 1, имеющего последовательность, указанную в положениях 161-508 SEQ ID NO: 1.
4. Способ получения гибридного белка по п. 1, имеющего последовательность, указанную в положениях 161-508 SEQ ID NO: 1, путем культивирования штамма по п. 3 в условиях, обеспечивающих рост клеток этого штамма и биосинтез гибридного белка, с последующим отделением полученной клеточной биомассы и выделением из нее гибридного белка в условиях, обеспечивающих перевод гибридного белка либо во фракцию растворимых клеточных белков, либо во фракцию нерастворимых клеточных белков, и дальнейшей очисткой гибридного белка из белоксодержащей фракции с использованием методов ионообменной хроматографии и ультрафильтрации.
|
||