+7 499 196 95 39
51
Патент 2814987
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ получения дрожжей Komagataella kurtzmanii с улучшенной способностью к усвоению сорбитола, включающий трансформацию клеток дрожжей K. kurtzmanii рекомбинантной плазмидной ДНК pPH727-Sdh115, содержащей: фрагмент ДНК, кодирующий ген SOR1 (PAS_chr1-1_0490) дрожжей K. phaffii GS115, включающий последовательность структурного гена сорбитолдегидрогеназы дрожжей K. phaffii размером 1047 н.п. и нативную 3'-UTR (3'-нетранслируемую область) длиной 211 н.п., определяемую как промотор гена SOR1, терминаторную область гена алкогольоксидазы АОХ1 дрожжей K. kurtzmanii, ген HIS4 дрожжей K. kurtzmanii, фрагменты дистальной части промоторной области гена алкогольоксидазы АОХ1 дрожжей K. kurtzmanii, фрагмент ДНК плазмиды pUC18, ген устойчивости ApR, обеспечивающий селекцию плазмидосодержащих клеток Е. coli на среде с ампициллином; либо трансформацию клеток дрожжей K. kurtzmanii рекомбинантной плазмидной ДНК pPH727-Sdh727, содержащей вместо гена SOR1 (PAS_chr1-1_0490) дрожжей K. phaffii (SOR1GS115) ген SOR1 дрожжей K. kurtzmanii (SOR1Y-727). Изобретение обеспечивает расширение арсенала продуцентов рекомбинантных белков на основе K. kurtzmanii, при ферментации которых используют сорбитол. 4 ил., 4 пр.
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ получения дрожжей Komagataella kurtzmanii с улучшенной способностью к усвоению сорбитола, включающий трансформацию клеток дрожжей K. kurtzmanii рекомбинантной плазмидной ДНК pPH727-Sdh115, содержащей: фрагмент ДНК, кодирующий ген SOR1 (PAS_chr1-1_0490) дрожжей K. phaffii GS115, включающий последовательность структурного гена сорбитолдегидрогеназы дрожжей K. phaffii размером 1047 н.п. и нативную 3'-UTR (3'-нетранслируемую область) длиной 211 н.п., определяемую как промотор гена SOR1, терминаторную область гена алкогольоксидазы АОХ1 дрожжей K. kurtzmanii, ген HIS4 дрожжей K. kurtzmanii, фрагменты дистальной части промоторной области гена алкогольоксидазы АОХ1 дрожжей K. kurtzmanii, фрагмент ДНК плазмиды pUC18, ген устойчивости ApR, обеспечивающий селекцию плазмидосодержащих клеток Е. coli на среде с ампициллином; либо трансформацию клеток дрожжей K. kurtzmanii рекомбинантной плазмидной ДНК pPH727-Sdh727, содержащей вместо гена SOR1 (PAS_chr1-1_0490) дрожжей K. phaffii (SOR1GS115) ген SOR1 дрожжей K. kurtzmanii (SOR1Y-727). Изобретение обеспечивает расширение арсенала продуцентов рекомбинантных белков на основе K. kurtzmanii, при ферментации которых используют сорбитол. 4 ил., 4 пр.
52
Патент 2814986
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к слитому пептиду, содержащему в своем составе расположенные от N-конца к C-концу самоассоциирующий пептид L6KD, пептид pepA1 и антиген. Изобретение эффективно для получения биосинтетических антиген-презентирующих наночастиц. 6 ил., 2 табл., 24 пр.
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к слитому пептиду, содержащему в своем составе расположенные от N-конца к C-концу самоассоциирующий пептид L6KD, пептид pepA1 и антиген. Изобретение эффективно для получения биосинтетических антиген-презентирующих наночастиц. 6 ил., 2 табл., 24 пр.
53
Патент 2812904
Изобретение относится к области водородной энергетики и может быть использовано для получения водорода и кислорода за счет тепла источников высокопотенциального тепла. Установка содержит батарею топливных элементов, блок питания, управления и регулирования, систему терморегулирования батареи топливных элементов, резервуар для воды, насос подачи воды, теплопроводы подачи тепла, высокотемпературный электролизер, трубопроводы подачи водорода и кислорода потребителям. Электролизер соединен трубопроводами двух контуров циркуляции газовых смесей через рекуперативный теплообменник, промежуточный теплообменник охлаждения продуктов электролиза и теплообменник нагрева и испарения воды со входом батареи топливных элементов, а выход батареи топливных элементов через циркуляционные насосы соединен со входом высокотемпературного электролизера. Резервуар для воды через насос подачи воды, теплообменник нагрева и испарения воды и догреватель водяного пара соединен со входом высокотемпературного электролизера, трубопроводы контуров циркуляции газовых смесей на входе в батарею топливных элементов соединены через конденсатор-охладитель для отделения воды с трубопроводами подачи водорода и кислорода потребителям, а конденсатор-охладитель соединен с резервуаром для воды. Батарея топливных элементов, промежуточный теплообменник охлаждения продуктов электролиза и конденсатор-охладитель снабжены системами терморегулирования и сброса тепла. Высокотемпературный электролизер и догреватель водяного пара соединены теплопроводами с источником высокопотенциального тепла. Техническим результатом является повышение энергетической эффективности преобразования высокопотенциального тепла в водород и кислород, высокая чистота получаемых продуктов и экологическая безопасность их производства. 1 ил.
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
Изобретение относится к области водородной энергетики и может быть использовано для получения водорода и кислорода за счет тепла источников высокопотенциального тепла. Установка содержит батарею топливных элементов, блок питания, управления и регулирования, систему терморегулирования батареи топливных элементов, резервуар для воды, насос подачи воды, теплопроводы подачи тепла, высокотемпературный электролизер, трубопроводы подачи водорода и кислорода потребителям. Электролизер соединен трубопроводами двух контуров циркуляции газовых смесей через рекуперативный теплообменник, промежуточный теплообменник охлаждения продуктов электролиза и теплообменник нагрева и испарения воды со входом батареи топливных элементов, а выход батареи топливных элементов через циркуляционные насосы соединен со входом высокотемпературного электролизера. Резервуар для воды через насос подачи воды, теплообменник нагрева и испарения воды и догреватель водяного пара соединен со входом высокотемпературного электролизера, трубопроводы контуров циркуляции газовых смесей на входе в батарею топливных элементов соединены через конденсатор-охладитель для отделения воды с трубопроводами подачи водорода и кислорода потребителям, а конденсатор-охладитель соединен с резервуаром для воды. Батарея топливных элементов, промежуточный теплообменник охлаждения продуктов электролиза и конденсатор-охладитель снабжены системами терморегулирования и сброса тепла. Высокотемпературный электролизер и догреватель водяного пара соединены теплопроводами с источником высокопотенциального тепла. Техническим результатом является повышение энергетической эффективности преобразования высокопотенциального тепла в водород и кислород, высокая чистота получаемых продуктов и экологическая безопасность их производства. 1 ил.
54
Патент 2812314
Изобретение относится к бесконтактным оптическим измерениям скорости, размера и концентрации капель жидкости в нестационарных аэрозольных потоках. Способ определения параметров капель в нестационарных аэрозольных потоках заключается в том, что поток аэрозоля направляют в фокальную плоскость объектива микроскопа, подсвеченную излучением лазера, подсвеченные капли регистрируют видеосистемой микроскопа в виде изображения отдельных треков, где ширину трека определяют размером движущейся капли, излучение маломощного диодного лазера, работающего в импульсно-периодическом режиме, пропускают через цилиндрическую линзу, которая формирует узкий щелевидный в сечении луч света, аэрозольный поток капель направляют в область фокусировки видеомикроскопа, расположенного под определенным углом к излучению маломощного диодного лазера, изображения фокусных точек капель аэрозоля регистрируются цифровым видеомикроскопом, при этом каждая капля, попавшая в область детектирования видеомикроскопа, детектируется на кадрах в виде прерывистого трека из точек, которые соответствуют отдельным импульсам излучения лазера и яркость которых определяется размером движущейся капли. Все кадры с изображениями треков передают на компьютер, где обрабатывают параметры прерывистых треков, определяют яркости точек, интервалы между точками для разных треков, количество зарегистрированных треков в единице объема за единицу времени, вычисляют скорости капель, строят соответствующие гистограммы и определяют распределение по размерам и скоростям, концентрацию капель. Технический результат - возможность одновременного определения размеров капель, их скоростей и концентрации в аэрозольном потоке. 5 ил. Способ определения параметров капель в нестационарных аэрозольных потоках, заключающийся в том, что поток аэрозоля направляют в фокальную плоскость объектива микроскопа, подсвеченную излучением лазера, подсвеченные лазером капли регистрируют видеосистемой микроскопа в виде изображения отдельных треков, где ширину трека определяют размером движущейся капли, отличающийся тем, что излучение маломощного диодного лазера, работающего в импульсно-периодическом режиме, пропускают через цилиндрическую линзу, которая формирует узкий щелевидный в сечении луч света, аэрозольный поток капель направляют в область фокусировки видеомикроскопа, расположенного под определенным углом к излучению маломощного диодного лазера, изображения фокусных точек капель аэрозоля регистрируются цифровым видеомикроскопом, при этом каждая капля, попавшая в область детектирования видеомикроскопа, детектируется на кадрах видеомикроскопа в виде прерывистого трека из точек, которые соответствуют отдельным импульсам излучения лазера и яркость которых определяется размером движущейся капли, все кадры видеомикроскопа с изображениями треков передают на компьютер, на котором при помощи специальной программы обрабатывают параметры прерывистых треков, определяют яркости точек, интервалы между точками для разных треков, количество зарегистрированных треков в единице объема за единицу времени, вычисляют скорости капель, строят соответствующие гистограммы и определяют распределение по размерам и скоростям, концентрацию капель.
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
Способ определения параметров капель в нестационарных аэрозольных потоках, заключающийся в том, что поток аэрозоля направляют в фокальную плоскость объектива микроскопа, подсвеченную излучением лазера, подсвеченные лазером капли регистрируют видеосистемой микроскопа в виде изображения отдельных треков, где ширину трека определяют размером движущейся капли, отличающийся тем, что излучение маломощного диодного лазера, работающего в импульсно-периодическом режиме, пропускают через цилиндрическую линзу, которая формирует узкий щелевидный в сечении луч света, аэрозольный поток капель направляют в область фокусировки видеомикроскопа, расположенного под определенным углом к излучению маломощного диодного лазера, изображения фокусных точек капель аэрозоля регистрируются цифровым видеомикроскопом, при этом каждая капля, попавшая в область детектирования видеомикроскопа, детектируется на кадрах видеомикроскопа в виде прерывистого трека из точек, которые соответствуют отдельным импульсам излучения лазера и яркость которых определяется размером движущейся капли, все кадры видеомикроскопа с изображениями треков передают на компьютер, на котором при помощи специальной программы обрабатывают параметры прерывистых треков, определяют яркости точек, интервалы между точками для разных треков, количество зарегистрированных треков в единице объема за единицу времени, вычисляют скорости капель, строят соответствующие гистограммы и определяют распределение по размерам и скоростям, концентрацию капель.
55
Патент 2810726
Изобретение относится к области формирования сильноточных непрерывных пучков ионов путем их экстракции из плотной плазмы ЭЦР разряда, создаваемой в открытой магнитной ловушке мощным излучением миллиметрового диапазона длин волн. Технический результат - возможность работы источника в непрерывном режиме, снижая вероятность электрического пробоя и негативного влияния паразитного разряда между трубой разрядной камеры и ускоряющим электродом системы формирования ионного пучка. Это достигается добавлением вставки из диэлектрического материала, изолирующего большую часть трубы разрядной камеры, находящуюся в непосредственной близости от ускоряющего электрода, и часть поверхности плазменного электрода за исключением зоны, непосредственно примыкающей к области ускорения ионного пучка около отверстия. 1 з.п. ф-лы, 1 ил.
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
Изобретение относится к области формирования сильноточных непрерывных пучков ионов путем их экстракции из плотной плазмы ЭЦР разряда, создаваемой в открытой магнитной ловушке мощным излучением миллиметрового диапазона длин волн. Технический результат - возможность работы источника в непрерывном режиме, снижая вероятность электрического пробоя и негативного влияния паразитного разряда между трубой разрядной камеры и ускоряющим электродом системы формирования ионного пучка. Это достигается добавлением вставки из диэлектрического материала, изолирующего большую часть трубы разрядной камеры, находящуюся в непосредственной близости от ускоряющего электрода, и часть поверхности плазменного электрода за исключением зоны, непосредственно примыкающей к области ускорения ионного пучка около отверстия. 1 з.п. ф-лы, 1 ил.
56
Патент 2809554
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен трансформант дрожжей Y. lipolytica, продуцирующий монотерпеноид линалоол, содержащий в составе хромосомы, по крайней мере, по одной копии каждого из следующих генов, ген HMGR1 Y. lipolytica, кодирующий 3-гидрокси-3-метилглютарил-кофермент А редуктазу, ген ERG12 Y. lipolytica, кодирующий мевалонаткиназу, модифицированный ген ERG2F88W-N119W Y. lipolytica, кодирующий фарнезилпирофосфатсинтазу, кодон-оптимизированный ген CrGPPS Catharanthus roseus, кодирующий фермент геранилпирофосфат синтазу, нуклеотидная последовательность которого приведена в перечне последовательностей под номером SEQ ID NO: 1, и кодон-оптимизированный ген LIS Actinidia arguta, кодирующий линалоолсинтазу, нуклеотидная последовательность которого приведена в перечне последовательностей под номером SEQ ID NO: 2. Также предложен штамм дрожжей Y. lipolytica ВКПМ Y-5015, продуцирующий линалоол. Изобретение обеспечивает повышение продукции линалоола. 1. Трансформант дрожжей Y. lipolytica, продуцирующий монотерпеноид линалоол, содержащий в составе хромосомы, по крайней мере, по одной копии каждого из следующих генов, ген HMGR1 Y. lipolytica, кодирующий 3-гидрокси-3-метилглютарил-кофермент А редуктазу, ген ERG12 Y. lipolytica, кодирующий мевалонаткиназу, модифицированный ген ERG2F88W-N119W Y. lipolytica, кодирующий фарнезилпирофосфатсинтазу, кодон-оптимизированный ген CrGPPS Catharanthus roseus, кодирующий фермент геранилпирофосфат синтазу, нуклеотидная последовательность которого приведена в перечне последовательностей под номером SEQ ID NO: 1, и кодон-оптимизированный ген LIS Actinidia arguta, кодирующий линалоолсинтазу, нуклеотидная последовательность которого приведена в перечне последовательностей под номером SEQ ID NO: 2. 2. Штамм дрожжей Y. lipolytica ВКПМ Y-5015 - продуцент линалоола.
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
1. Трансформант дрожжей Y. lipolytica, продуцирующий монотерпеноид линалоол, содержащий в составе хромосомы, по крайней мере, по одной копии каждого из следующих генов, ген HMGR1 Y. lipolytica, кодирующий 3-гидрокси-3-метилглютарил-кофермент А редуктазу, ген ERG12 Y. lipolytica, кодирующий мевалонаткиназу, модифицированный ген ERG2F88W-N119W Y. lipolytica, кодирующий фарнезилпирофосфатсинтазу, кодон-оптимизированный ген CrGPPS Catharanthus roseus, кодирующий фермент геранилпирофосфат синтазу, нуклеотидная последовательность которого приведена в перечне последовательностей под номером SEQ ID NO: 1, и кодон-оптимизированный ген LIS Actinidia arguta, кодирующий линалоолсинтазу, нуклеотидная последовательность которого приведена в перечне последовательностей под номером SEQ ID NO: 2. 2. Штамм дрожжей Y. lipolytica ВКПМ Y-5015 - продуцент линалоола.
57
Патент 2808945
Изобретение относится к рентгеновской оптике. Способ управления угловой расходимостью рентгеновского излучения, включающий воздействие на дифракционный элемент, при этом пучок монохроматичного рентгеновского излучения после прохождения через щелевую диафрагму подают на дифракционный элемент, в качестве которого применяют магнитоупорядоченный кристалл, выполненный из бората железа FeBO3, установленный в положении максимума дифракционного отражения, и изменяют угловые параметры рентгеновского излучения путем приложения к дифракционному элементу внешнего магнитного поля различной напряженности. Технический результат – повышение точности измерений. 1 з.п. ф-лы, 3 ил.
Федеральное государственное учреждение "Федеральный научно-исследовательский центр "Кристаллография и фотоника" Российской академии наук" (RU)
Изобретение относится к рентгеновской оптике. Способ управления угловой расходимостью рентгеновского излучения, включающий воздействие на дифракционный элемент, при этом пучок монохроматичного рентгеновского излучения после прохождения через щелевую диафрагму подают на дифракционный элемент, в качестве которого применяют магнитоупорядоченный кристалл, выполненный из бората железа FeBO3, установленный в положении максимума дифракционного отражения, и изменяют угловые параметры рентгеновского излучения путем приложения к дифракционному элементу внешнего магнитного поля различной напряженности. Технический результат – повышение точности измерений. 1 з.п. ф-лы, 3 ил.
58
Патент 2808903
Изобретение относится к области нанооксидных материалов, конкретно к методу получения нанопорошка триоксида молибдена, применяемого для изготовления сцинтилляторов сложного состава, как катализатора для селективного окисления в качестве присадки в масла для снижения трения и как промежуточного продукта для получения тонких прозрачных оксидных пленок. Способ получения нанопорошка MoO3 в реакторе путем испарения порошка MoO3 и осаждения его паров на подложку характеризуется тем, что реактор, внутри которого размещена подложка с порошком MoO3, заполняют гелием под давлением 6-8 МПа, нагревают порошок до 650-700°C в течение 10-20 минут, а затем охлаждают до комнатной температуры и извлекают из реактора. Техническим результатом изобретения является обеспечение способа изготовления целевого материала с диаметром стержней 5-10 нм на простом по конструкции оборудовании. 2 ил., 6 пр.
Федеральное государственное учреждение "Федеральный научно-исследовательский центр "Кристаллография и фотоника" Российской академии наук" (RU)
Изобретение относится к области нанооксидных материалов, конкретно к методу получения нанопорошка триоксида молибдена, применяемого для изготовления сцинтилляторов сложного состава, как катализатора для селективного окисления в качестве присадки в масла для снижения трения и как промежуточного продукта для получения тонких прозрачных оксидных пленок. Способ получения нанопорошка MoO3 в реакторе путем испарения порошка MoO3 и осаждения его паров на подложку характеризуется тем, что реактор, внутри которого размещена подложка с порошком MoO3, заполняют гелием под давлением 6-8 МПа, нагревают порошок до 650-700°C в течение 10-20 минут, а затем охлаждают до комнатной температуры и извлекают из реактора. Техническим результатом изобретения является обеспечение способа изготовления целевого материала с диаметром стержней 5-10 нм на простом по конструкции оборудовании. 2 ил., 6 пр.
59
Патент 2808670
Изобретение относится к области фармацевтики, а именно к бифункциональному хелатору для получения радиофармпрепаратов, включающему в себя хелатор ДОТА с присоединенным к нему через метиленовую группу 4-метоксибензальдегидом указанной ниже формулы. Изобретение направлено на решение задачи, возможно, более простого и эффективного получения широкого круга прекурсоров для радиофармацевтических препаратов, прежде всего, содержащих пептиды в качестве векторов, нацеленных на мишени в опухоли. Техническим результатом является получение бифункционального хелатора ДОТА для производства прекурсоров радиофармпрепаратов. 4 пр. Бифункциональный хелатор для получения радиофармпрепаратов, включающий в себя хелатор ДОТА с присоединенным к нему через метиленовую группу 4-метоксибензальдегидом следующей формулы (СМ ПАТЕНТ)
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
Бифункциональный хелатор для получения радиофармпрепаратов, включающий в себя хелатор ДОТА с присоединенным к нему через метиленовую группу 4-метоксибензальдегидом следующей формулы (СМ ПАТЕНТ)
60
Патент 2807615
Способ получения биологически активных рекомбинантных протеинов, содержащих до 4 дисульфидных связей. Способ предусматривает разработку генетической конструкции, кодирующей предшественник целевого белка-мишени, содержащий в своем составе расположенные в порядке перечисления от N-конца к С-концу последовательность самоассоциирующего пептида L6KD, включающего следующие друг за другом 6 остатков лейцина, последовательность белка SUMO - продукта гена Smt3 дрожжей Saccharomyces cerevisiae и последовательность целевого белка-мишени, первый N-концевой остаток которого, следующий за последовательностью белка SUMO, отличен от пролина. Созданную генетическую конструкцию используют для получения целевого белка-мишени путем трансформации этой конструкцией подходящего реципиентного штамма, культивирования трансформированного штамма в условиях, обеспечивающих экспрессию генетической конструкции и микробиологический синтез предшественника целевого белка-мишени в форме нерастворимых телец включения, с последующим выделением синтезированных телец включения из клеток штамма-продуцента, высвобождением из их состава растворимого целевого белка-мишени с помощью подходящей производной SUMO-специфичной протеиназы, отделением остатков нерастворимых телец включения с помощью центрифугирования и дальнейшей очисткой высвобожденного белка-мишени с использованием методов молекулярной биологии, без применения ренатурации. Изобретение обеспечивает эффективное получение биологически активных рекомбинантных белков-мишеней, производимых с использованием микробиологического синтеза без применения процедур денатурации/ренатурации. 5 ил., 2 табл., 16 пр. Способ получения биологически активных рекомбинантных протеинов, содержащих до 4 дисульфидных связей, заключающийся в разработке генетической конструкции, кодирующей предшественник целевого белка-мишени, содержащий в своем составе расположенные в порядке перечисления от N-конца к С-концу последовательность самоассоциирующего пептида L6KD, заключающего следующие друг за другом 6 остатков лейцина, последовательность белка SUMO - продукта гена Smt3 дрожжей Saccharomyces cerevisiae и последовательность целевого белка-мишени, первый N-концевой остаток, следующий за последовательностью белка SUMO, отличен от пролина, и использования созданной генетической конструкции для получения целевого белка-мишени путем трансформации этой конструкцией подходящего реципиентного штамма, культивирования трансформированного штамма в условиях, обеспечивающих экспрессию генетической конструкции и микробиологический синтез предшественника целевого белка-мишени в форме нерастворимых телец включения, с последующим выделением синтезированных телец включения из клеток штамма-продуцента, высвобождением из их состава растворимого целевого белка-мишени с помощью подходящей производной SUMO-специфичной протеиназы, отделением остатков нерастворимых телец включения с помощью центрифугирования и дальнейшей очисткой высвобожденного белка-мишени с использованием методов молекулярной биологии, известных из уровня техники, без применения ренатурации.
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
Способ получения биологически активных рекомбинантных протеинов, содержащих до 4 дисульфидных связей, заключающийся в разработке генетической конструкции, кодирующей предшественник целевого белка-мишени, содержащий в своем составе расположенные в порядке перечисления от N-конца к С-концу последовательность самоассоциирующего пептида L6KD, заключающего следующие друг за другом 6 остатков лейцина, последовательность белка SUMO - продукта гена Smt3 дрожжей Saccharomyces cerevisiae и последовательность целевого белка-мишени, первый N-концевой остаток, следующий за последовательностью белка SUMO, отличен от пролина, и использования созданной генетической конструкции для получения целевого белка-мишени путем трансформации этой конструкцией подходящего реципиентного штамма, культивирования трансформированного штамма в условиях, обеспечивающих экспрессию генетической конструкции и микробиологический синтез предшественника целевого белка-мишени в форме нерастворимых телец включения, с последующим выделением синтезированных телец включения из клеток штамма-продуцента, высвобождением из их состава растворимого целевого белка-мишени с помощью подходящей производной SUMO-специфичной протеиназы, отделением остатков нерастворимых телец включения с помощью центрифугирования и дальнейшей очисткой высвобожденного белка-мишени с использованием методов молекулярной биологии, известных из уровня техники, без применения ренатурации.