Штаммы микроорганизмов

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложена генетическая конструкция, кодирующая предшественник белка YB-1 человека, содержащий последовательность декстран-связывающего домена GBD-7 глюкансукразы штамма NRRL B512-F, последовательность температурочувствительного варианта IntMUT интеина PRP8 P. chrysogenum и последовательность зрелого белка YB-1 человека. Указанная генетическая конструкция имеет последовательность SEQ ID N1. Предложен штамм Escherichia coli ECR-proYB-1, продуцирующий предшественник белка YB-1 человека и полученный путем введения вышеуказанной генетической конструкции в клетки реципиентного штамма Escherichia coli ВКПМ В-10189. Предложен также способ микробиологического синтеза предшественника белка YB-1 человека, предусматривающий культивирование вышеуказанного штамма в подходящих условиях в присутствии индуктора изопропил-?-D-1-тиогалактопиранозида (ИПТГ) или лактозы. Группа изобретений обеспечивает синтез предшественника белка YB-1 человека во фракции нерастворимых белков клеток E. coli, обладающего повышенной структурной гомогенностью. 1. Генетическая конструкция, имеющая последовательность SEQ ID N1 и кодирующая предшественник белка YB-1 человека, содержащего в своем составе последовательность декстран-связывающего домена GBD-7 глюкансукразы штамма NRRL B512-F, последовательность температурочувствительного варианта IntMUT интеина PRP8 P. chrysogenum и последовательность зрелого белка YB-1 человека. 2. Штамм Escherichia coli ECR-proYB-1 - продуцент предшественника белка YB-1 человека, полученный путем введения генетической конструкции по п. 1 в клетки реципиентного штамма Escherichia coli ВКПМ В-10189. 3. Способ микробиологического синтеза предшественника белка YB-1 человека, путем культивирования штамма-продуцента по п. 2 в подходящих условиях в присутствии индуктора изопропил-?-D-1-тиогалактопиранозида (ИПТГ) или лактозы.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Представлен бесплазмидный рекомбинантный штамм Escherichia coli, обладающий конститутивной аспартазной активностью и полученный путем замены промотора гена aspA в штамме Escherichia coli MG1655 на промотор pG25 бактериофага Т5. Представлен способ синтеза L-аспарагиновой кислоты из фумарата аммония с использованием в качестве биокатализатора указанного рекомбинантного штамма в виде или свободных, или иммобилизованных клеток. Группа изобретений обеспечивает более эффективное получение L-аспарагиновой кислоты и позволяет сократить время ее получения в 3-4 раза за счет более высокой аспартазной активности биокатализатора. 1. Бесплазмидный рекомбинантный штамм Escherichia coli, обладающий конститутивной аспартазной активностью и полученный путем замены промотора гена aspA в штамме Escherichia coli MG1655 на промотор pG25 бактериофага Т5. 2. Способ синтеза L-аспарагиновой кислоты из фумарата аммония с использованием в качестве биокатализатора рекомбинантного штамма по п.1 в виде или свободных, или иммобилизованных клеток.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Предложены варианты бактерий Escherichia coli, являющихся продуцентами янтарной кислоты. Бактерия Escherichia coli модифицирована таким образом, что гены асkА, pta, рохВ, ldhA, adhE, ptsG в ней инактивированы, экспрессия генов galP и glk усилена, и бактерия обладающий активностью пируват карбоксилазы. Также предложен вариант бактерии Escherichia coli, обладающий инактивированными генами ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, ptsG, iclR, усиленной экспрессией генов galP и glk, и активностью пируват карбоксилазы. Также предложен вариант бактерии Escherichia coli, обладающий инактивированными генами ackA, pta, рохВ, ldhA, adhE, ptsG, усиленной экспрессией генов galP и glk, усиленной экспрессией генов асеЕ, aceF и lpdA, и активностью пируват карбоксилазы. Также предложен вариант бактерии Escherichia coli, обладающий инактивированными генами асkА, pta, рохВ, ldhA, adhE, ptsG, iclR, усиленной экспрессией генов galP и glk, усиленной экспрессией генов асеЕ, aceF и lpdA, и активностью пируват карбоксилазы. Также предложен вариант бактерии Escherichia coli, обладающий инактивированными генами асkА, pta, рохВ, IdhA, adhE, ptsG, pflB, усиленной экспрессией генов galP и glk, усиленной экспрессией генов асеЕ, aceF и lpdA, и активностью пируват карбоксилазы. Также предложен вариант бактерии Escherichia coli, обладающий инактивированными генами асkА, pta, рохВ, ldhA, adhE, ptsG, pflB, iclR, усиленной экспрессией генов galP и glk, усиленной экспрессией генов асеЕ, aceF и lpdA, и активностью пируват карбоксилазы. Предложен способ получения янтарной кислоты с использованием указанных вариантов. Группа изобретений обеспечивает увеличение выхода янтарной кислоты. 1. Бактерия Escherichia coli - продуцент янтарной кислоты, модифицированная таким образом, что гены ackА, pta, рохВ, ldhA, adhE, ptsG в ней инактивированы, экспрессия генов galP и glk усилена, и бактерия обладает активностью пируват карбоксилазы. 2. Бактерия по п. 1, отличающаяся тем, что активность пируват карбоксилазы обеспечивается за счет введения в бактерию молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1. 3. Бактерия по п. 1, отличающаяся тем, что экспрессия генов galP и glk усилена за счет замены в хромосоме бактерии нуклеотидных последовательностей природных промоторов, контролирующих экспрессию генов galP и glk, на более сильные промоторы. 4. Бактерия Escherichia coli - продуцент янтарной кислоты, модифицированная таким образом, что гены ackA, pta, poxB, IdhA, adhE, ptsG, iclR в ней инактивированы, экспрессия генов galP и glk усилена, и бактерия обладает активностью пируват карбоксилазы. 5. Бактерия по п. 4, отличающаяся тем, что активность пируват карбоксилазы обеспечивается за счет введения в бактерию молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1. 6. Бактерия по п. 4, отличающаяся тем, что экспрессия генов galP и glk усилена за счет замены в хромосоме бактерии нуклеотидных последовательностей природных промоторов, контролирующих экспрессию генов galP и glk, на более сильные промоторы. 7. Бактерия Escherichia coli - продуцент янтарной кислоты, модифицированная таким образом, что гены аскА, pta, рохВ, ldhA, adhE, ptsG в ней инактивированы, экспрессия генов galP и glk усилена, экспрессия генов асеЕ, aceF и lpdA усилена, и бактерия обладает активностью пируват карбоксилазы. 8. Бактерия по п. 7, отличающаяся тем, что активность пируват карбоксилазы обеспечивается за счет введения в бактерию молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1. 9. Бактерия по п. 7, отличающаяся тем, что экспрессия генов galP и glk, а также генов асеЕ, aceF и lpdA усилена за счет замены в хромосоме бактерии нуклеотидных последовательностей природных промоторов, контролирующих экспрессию генов galP и glk, а также генов оперона aceEF-lpdA, на более сильные промоторы. 10. Бактерия Escherichia coli - продуцент янтарной кислоты, модифицированная таким образом, что гены ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, ptsG, iclR в ней инактивированы, экспрессия генов galP и glk усилена, экспрессия генов асеЕ, aceF и lpdA усилена, и бактерия обладает активностью пируват карбоксилазы. 11. Бактерия по п. 10, отличающаяся тем, что активность пируват карбоксилазы обеспечивается за счет введения в клетки бактерии молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1. 12. Бактерия по п. 10, отличающаяся тем, что экспрессия генов galP и glk, а также генов асеЕ, aceF и lpdA усилена за счет замены в хромосоме бактерии нуклеотидных последовательностей природных промоторов, контролирующих экспрессию генов galP и glk, а также генов оперона aceEF-lpdA, на более сильные промоторы. 13. Бактерия Escherichia coli - продуцент янтарной кислоты, модифицированная таким образом, что гены ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, ptsG, pflB в ней инактивированы, экспрессия генов galP и glk усилена, экспрессия генов асеЕ, aceF и lpdA усилена, и бактерия обладает активностью пируват карбоксилазы. 14. Бактерия по п. 13, отличающаяся тем, что активность пируват карбоксилазы обеспечивается за счет введения в бактерию молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1. 15. Бактерия по п. 13, отличающаяся тем, что экспрессия генов galP и glk, а также генов асеЕ, aceF и lpdA усилена за счет замены в хромосоме бактерии нуклеотидных последовательностей природных промоторов, контролирующих экспрессию генов galP и glk, а также генов оперона aceEF-lpdA, на более сильные промоторы. 16. Бактерия Escherichia coli - продуцент янтарной кислоты, модифицированная таким образом, что гены ackА, pta, рохВ, ldhA, adhE, ptsG, pflB, iclR в ней инактивированы, экспрессия генов galP и glk усилена, экспрессия генов асеЕ, aceF и lpdA усилена, и бактерия обладает активностью пируват карбоксилазы. 17. Бактерия по п. 16, отличающаяся тем, что активность пируват карбоксилазы обеспечивается за счет введения в бактерию молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1. 18. Бактерия по п. 16, отличающаяся тем, что экспрессия генов galP и glk, а также генов асеЕ, aceF и lpdA усилена за счет замены в хромосоме бактерии нуклеотидных последовательностей природных промоторов, контролирующих экспрессию генов galP и glk, а также генов оперона aceEF-lpdA, на более сильные промоторы. 19. Способ получения янтарной кислоты путем культивирования бактерии по п. 1, или 4, или 7, или 10, или 13, или 16 в питательной среде и выделения янтарной кислоты из культуральной жидкости.

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложена рекомбинантная мутантная ксилоглюканаза AsCeGH12b-m2, имеющая аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, которая соответствует аминокислотной последовательности ксилоглюканазы семейства 12 из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612 с заменой природного остатка лейцина в положении 18 остатком изолейцина и остатка тирозина в положении 37 остатком валина, обеспечивающим повышение термостабильности модифицированного фермента по сравнению с ферментом дикого типа. Также предложен рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-5262 - продуцент секретируемой ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2, имеющей SEQ ID NO: 1 и кодируемой геном AsCeGH12b-m2, имеющим SEQ ID NO: 2. Разработан способ микробиологического синтеза ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2, предусматривающий культивирование указанного штамма в аэробных условиях в подходящей питательной среде. Изобретение обеспечивает высокий уровень продукции ксилоглюканазы AsCeGH12b-m2 с повышенной термостабильностью, а также эффективное снижение вязкости растворов ксилоглюкана. 3 н.п. ф-лы, 1 ил., 3 пр.

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный исследовательский центр «Курчатовский институт» (RU)

Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии и касается рекомбинантного штамма дрожжей Schizosaccharomyces pombe - продуцента L-молочной кислоты, не продуцирующего этанол. Предложен штамм дрожжей Schizosaccharomyces pombe ВКПМ Y-5156, несущий в составе хромосомы два гена L-лактатдегидрогеназы из Lactobacillus pentosus, один из которых заместил ген алкогольдегидрогеназы 1, и содержащий ген L-лактатдегидрогеназы из Lactobacillus acidophilus. Изобретение обеспечивает получение штамма дрожжей с повышенной продукцией L-молочной кислоты и не образующего этанол в качестве побочного продукта. 2 ил., 2 пр.

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный исследовательский центр «Курчатовский институт» (RU)