+7 499 196 95 39
61
Патент 2811434
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен рекомбинантный штамм Escherichia coli ВКПМ В-14340, являющийся продуцентом эндоглюканазы семейства GH12 ThiTeEgh12, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO.: 2. Также предложен способ микробиологического синтеза эндоглюканазы семейства GH12 ThiTeEgh12, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO.: 2, предусматривающий культивирование указанного штамма Escherichia coli ВКПМ В-14340. Изобретение обеспечивает получение рекомбинантной эндоглюканазы из Thielavia terrestris, которая характеризуется высоким температурным максимумом активности и высокой термостабильностью. 2 н.п. ф-лы, 1 ил., 3 пр.
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен рекомбинантный штамм Escherichia coli ВКПМ В-14340, являющийся продуцентом эндоглюканазы семейства GH12 ThiTeEgh12, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO.: 2. Также предложен способ микробиологического синтеза эндоглюканазы семейства GH12 ThiTeEgh12, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO.: 2, предусматривающий культивирование указанного штамма Escherichia coli ВКПМ В-14340. Изобретение обеспечивает получение рекомбинантной эндоглюканазы из Thielavia terrestris, которая характеризуется высоким температурным максимумом активности и высокой термостабильностью. 2 н.п. ф-лы, 1 ил., 3 пр.
62
Патент 2546237
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к штамму - продуценту треонина. Штамм Escherichia coli ВКПМ В-11820 получен путем инактивации у штамма Escherichia coli ВКПМ В-3996 генов poxB и sstT на фоне увеличенной экспрессии гена galP за счет замены его природного промотора на синтетический промотор Ptac3 и увеличенной экспрессии генов оперона thrABC за счет замены его природного промотора на фаговый промотор PA1, удаления последовательности регуляторного пептида thrL и введения десенсибилизирующей мутации thrA433. Полученный штамм позволяет получать L-треонин с высокой эффективностью. Штамм Escherichia coli ВКПМ В-11820 - продуцент аминокислоты L-треонина, полученный путем инактивации у штамма Escherichia coli ВКПМ В-3996 генов poxB и sstT на фоне увеличенной экспрессии гена galP за счет замены его природного промотора на синтетический промотор Ptac3 и увеличенной экспрессии генов оперона thrABC за счет замены его природного промотора на фаговый промотор PA1, удаления последовательности регуляторного пептида thrL и введения десенсибилизирующей мутации thrA433.
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)
Штамм Escherichia coli ВКПМ В-11820 - продуцент аминокислоты L-треонина, полученный путем инактивации у штамма Escherichia coli ВКПМ В-3996 генов poxB и sstT на фоне увеличенной экспрессии гена galP за счет замены его природного промотора на синтетический промотор Ptac3 и увеличенной экспрессии генов оперона thrABC за счет замены его природного промотора на фаговый промотор PA1, удаления последовательности регуляторного пептида thrL и введения десенсибилизирующей мутации thrA433.
63
Патент 2502797
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу получения гидролазы эфиров альфа-аминокислот путем биосинтеза рекомбинантными бактериями. Для осуществления способа сконструирован рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli ВКПМ В-11271 - продуцент гидролазы эфиров альфа-аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915, полученный путем трансформации штамма-реципиента Escherichia coli BL21(DE3) плазмидной ДНК, соответствующей нуклеотидной последовательности SEQ ID NO 1, содержащей ген aehR гидролазы эфиров альфа-аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915, не модифицированный на 5?-конце последовательностью, кодирующей полигистидиновый «хвост», и находящийся под контролем промотора Т7, а также ген устойчивости к канамицину Kan. Изобретение позволяет получать гидролазу эфиров альфа-аминокислот с высокой степенью эффективности. 1. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli ВКПМ В-11271 - продуцент гидролазы эфиров альфа-аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915, полученный путем трансформации штамма- реципиента Escherichia coli BL21 (DE3) плазмидной ДНК, соответствующей нуклеотидной последовательности SEQ ID NO 1, содержащей ген aehR гидролазы эфиров альфа-аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915, не модифицированный на 5?-конце последовательностью, кодирующей полигистидиновый «хвост», и находящийся под контролем промотора Т7, а также ген устойчивости к канамицину Каn. 2. Способ микробиологического синтеза гидролазы эфиров альфа-аминокислот, не модифицированной на N-конце полигистидиновой последовательностью, предусматривающий культивирование бактерий, содержащих ген aehR из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915, в подходящей питательной среде, отличающийся тем, что в качестве продуцента используют рекомбинантный штамм по п.1, в состав среды включают канамицин, а экспрессию целевого продукта осуществляют добавлением изопропил-?-D-тиогалактозида в качестве индуктора.
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)
1. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli ВКПМ В-11271 - продуцент гидролазы эфиров альфа-аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915, полученный путем трансформации штамма- реципиента Escherichia coli BL21 (DE3) плазмидной ДНК, соответствующей нуклеотидной последовательности SEQ ID NO 1, содержащей ген aehR гидролазы эфиров альфа-аминокислот из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915, не модифицированный на 5?-конце последовательностью, кодирующей полигистидиновый «хвост», и находящийся под контролем промотора Т7, а также ген устойчивости к канамицину Каn. 2. Способ микробиологического синтеза гидролазы эфиров альфа-аминокислот, не модифицированной на N-конце полигистидиновой последовательностью, предусматривающий культивирование бактерий, содержащих ген aehR из Xanthomonas rubrilineans ВКПМ В-9915, в подходящей питательной среде, отличающийся тем, что в качестве продуцента используют рекомбинантный штамм по п.1, в состав среды включают канамицин, а экспрессию целевого продукта осуществляют добавлением изопропил-?-D-тиогалактозида в качестве индуктора.
64
2562166
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой гибридный белок на основе мутантной рекомбинантной L-аспарагиназы бактерий Wolinella succinogenes с пониженной глутаминазной активностью и повышенной устойчивостью к действию трипсина, слитой с N-концевой аминокислотной последовательностью гепарин-связывающего пептида. Изобретение относится также к штаммам-продуцентам и к способу получения этого гибридного белка. Изобретение позволяет расширить ассортимент гибридных белков на основе аспарагиназы, обладающих противоопухолевой активностью.
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
1. Гибридный белок, обладающий противоопухолевой активностью и заключающий в своем составе аминокислотную последовательность мутантной L-аспарагиназы бактерий Wolinella succinogenes, в которой аминокислотный остаток валина в положении 23 природной последовательности заменен на аминокислотный остаток глутамина, а аминокислотный остаток лизина в положении 24 природной последовательности заменен на остаток треонина, слитую с аминокислотной последовательностью гепарин-связывающего пептида НВ1, где гибридный белок имеет последовательность, указанную в SEQ ID NO: 3, или последовательность, указанную в положениях 161-508 SEQ ID NO: 1. 2. Штамм Escherichia coli ECR-89 - продуцент гибридного белка по п. 1, имеющего последовательность SEQ ID NO: 3, полученный путем трансформации реципиентного штамма E. coli BL21(DE3) плазмидой pET28-Was89, сконструированной на основе вектора pET28b(+) и содержащей структурный ген гибридного белка, имеющего последовательность SEQ ID NO: 3. 3. Штамм Escherichia coli ВКПМ В-11955 - продуцент гибридного белка по п. 1, имеющего последовательность, указанную в положениях 161-508 SEQ ID NO: 1. 4. Способ получения гибридного белка по п. 1, имеющего последовательность, указанную в положениях 161-508 SEQ ID NO: 1, путем культивирования штамма по п. 3 в условиях, обеспечивающих рост клеток этого штамма и биосинтез гибридного белка, с последующим отделением полученной клеточной биомассы и выделением из нее гибридного белка в условиях, обеспечивающих перевод гибридного белка либо во фракцию растворимых клеточных белков, либо во фракцию нерастворимых клеточных белков, и дальнейшей очисткой гибридного белка из белоксодержащей фракции с использованием методов ионообменной хроматографии и ультрафильтрации.
65
Патент 2728242
Изобретение относится к биотехнологии и микробиологической промышленности. Предложен штамм Escherichia coli ВКПМ В-13427, продуцирующий L-треонин. Штамм имеет генотип rphwt, ?tdcBCDE, ?kbl-tdh, ?sstT, rpsLK43R, galKTyr38TAG, araBTyr57TAG, rhaBTyr163TAG, PH207-thrA433BC-TrrnB, P1077PR-rhtA, spoTT252ins(CATGAT)253A; G520T; C1585T. Штамм характеризуется высокой скоростью роста и скоростью синтеза L-треонина. Изобретение позволяет расширить арсенал штаммов Escherichia coli, продукцирующих L-треонин. Штамм Escherichia coli ВКПМ В-13427 с генотипом rphwt, ?tdcBCDE, ?kbl-tdh, ?sstT, rpsLK43R, galKTyr38TAG, araBTyr57TAG, rhaBTyr163TAG, PH207-thrA433BC-TrrnB, P1077PR-rhtA, spoTT252ins(CATGAT)253A; G520T; C1585T - продуцент L-треонина.
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)
Штамм Escherichia coli ВКПМ В-13427 с генотипом rphwt, ?tdcBCDE, ?kbl-tdh, ?sstT, rpsLK43R, galKTyr38TAG, araBTyr57TAG, rhaBTyr163TAG, PH207-thrA433BC-TrrnB, P1077PR-rhtA, spoTT252ins(CATGAT)253A; G520T; C1585T - продуцент L-треонина.
66
Патент 2573936
Группа изобретений относится к штамму бактерий Escherichia coli FUM1.0, являющемуся продуцентом фумаровой кислоты, и способу получения фумаровой кислоты с использованием данного штамма. Штамм получен путем инактивации генов ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, pflB, frdA, frdB, sdhA, sdhB, aceA, асеВ и ptsG и усиления экспрессии генов galP и glk в штамме Escherichia coli K-12 MG1655. Способ получения фумаровой кислоты предусматривает культивирование указанного штамма в подходящих условиях с последующим выделением фумаровой кислоты из культуральной жидкости. Группа изобретений обеспечивает высокую продукцию фумаровой кислоты. Коэффициент конверсии глюкозы в фумаровую кислоту при культивировании предложенного штамма составляет 1,31 моль/моль, что составляет 65,5% от теоретически возможного максимума. 2 1. Штамм бактерий Escherichia coli FUM1.0 - продуцент фумаровой кислоты, полученный путем инактивации генов ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, pflB, frdA, frdB, sdhA, sdhB, aceA, асеВ и ptsG, и усиления экспрессии генов galP и glk в штамме Escherichia coli K-12 MG1655. 2. Штамм бактерий Escherichia coli по п. 1, отличающийся тем, что экспрессия генов galP и glk усилена за счет замены в хромосоме штамма нуклеотидных последовательностей природных промоторов, контролирующих экспрессию генов galP и glk, на более сильные промоторы. 3. Способ получения фумаровой кислоты путем культивирования штамма по п. 1 в подходящих условиях с последующим выделением фумаровой кислоты из культуральной жидкости.
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)
1. Штамм бактерий Escherichia coli FUM1.0 - продуцент фумаровой кислоты, полученный путем инактивации генов ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, pflB, frdA, frdB, sdhA, sdhB, aceA, асеВ и ptsG, и усиления экспрессии генов galP и glk в штамме Escherichia coli K-12 MG1655. 2. Штамм бактерий Escherichia coli по п. 1, отличающийся тем, что экспрессия генов galP и glk усилена за счет замены в хромосоме штамма нуклеотидных последовательностей природных промоторов, контролирующих экспрессию генов galP и glk, на более сильные промоторы. 3. Способ получения фумаровой кислоты путем культивирования штамма по п. 1 в подходящих условиях с последующим выделением фумаровой кислоты из культуральной жидкости.
67
Патент 2620942
Группа изобретений относится к области биотехнологии. Представлен бесплазмидный рекомбинантный штамм Escherichia coli, обладающий конститутивной аспартазной активностью и полученный путем замены промотора гена aspA в штамме Escherichia coli MG1655 на промотор pG25 бактериофага Т5. Представлен способ синтеза L-аспарагиновой кислоты из фумарата аммония с использованием в качестве биокатализатора указанного рекомбинантного штамма в виде или свободных, или иммобилизованных клеток. Группа изобретений обеспечивает более эффективное получение L-аспарагиновой кислоты и позволяет сократить время ее получения в 3-4 раза за счет более высокой аспартазной активности биокатализатора. 1. Бесплазмидный рекомбинантный штамм Escherichia coli, обладающий конститутивной аспартазной активностью и полученный путем замены промотора гена aspA в штамме Escherichia coli MG1655 на промотор pG25 бактериофага Т5. 2. Способ синтеза L-аспарагиновой кислоты из фумарата аммония с использованием в качестве биокатализатора рекомбинантного штамма по п.1 в виде или свободных, или иммобилизованных клеток.
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)
1. Бесплазмидный рекомбинантный штамм Escherichia coli, обладающий конститутивной аспартазной активностью и полученный путем замены промотора гена aspA в штамме Escherichia coli MG1655 на промотор pG25 бактериофага Т5. 2. Способ синтеза L-аспарагиновой кислоты из фумарата аммония с использованием в качестве биокатализатора рекомбинантного штамма по п.1 в виде или свободных, или иммобилизованных клеток.
68
Патент 2639248
Группа изобретений относится к области биотехнологии. Предложен рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-4299 – продуцент секретируемой ксилоглюканазы, кодируемой геном AsCeGH12b (SEQ ID NO: 1), клонированным из Aspergillus cervinus ВКПМ F-612. Предложен способ микробиологического синтеза ксилоглюканазы, кодируемой указанным геном, путем культивирования указанного рекомбинантного штамма в аэробных условиях в подходящей питательной среде до максимального накопления целевого продукта. Группа изобретений позволяет получать термостабильную ксилоглюканазу семейства GH12, с оптимумом активности при 55°C, рН 5.0, в количестве не менее 30 единиц на 1 мл культуральной жидкости. 1. Рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-4299 - продуцент секретируемой ксилоглюканазы, кодируемой геном, соответствующим последовательности SEQ ID NO 1. 2. Способ микробиологического синтеза ксилоглюканазы, путем культивирования рекомбинантного штамма дрожжей Pichia pastoris, содержащего ген ксилоглюканазы, в аэробных условиях в подходящей питательной среде до максимального накопления целевого продукта, отличающийся тем, что в качестве продуцента используют рекомбинантный штамм по п.1, а целевым продуктом является ксилоглюканаза, соответствующая последовательности SEQ ID NO 2.
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)
1. Рекомбинантный штамм дрожжей Pichia pastoris ВКПМ Y-4299 - продуцент секретируемой ксилоглюканазы, кодируемой геном, соответствующим последовательности SEQ ID NO 1. 2. Способ микробиологического синтеза ксилоглюканазы, путем культивирования рекомбинантного штамма дрожжей Pichia pastoris, содержащего ген ксилоглюканазы, в аэробных условиях в подходящей питательной среде до максимального накопления целевого продукта, отличающийся тем, что в качестве продуцента используют рекомбинантный штамм по п.1, а целевым продуктом является ксилоглюканаза, соответствующая последовательности SEQ ID NO 2.
69
2489481
Группа изобретений относится к области биотехнологии. Культивируют микроорганизм-продуцент в подходящей питательной среде с последующим выделением и очисткой целевого белка. При этом в качестве продуцента используют дрожжи Saccharomyces cerevisiae, трансформированные вектором экспрессии, который содержит область инициации репликации эндогенной 2-мкм плазмиды дрожжей Saccharomyces cerevisiae, а также промотор GAL1 дрожжей, контролирующий экспрессию гена, включающего последовательность ДНК SEQ ID NO:1, кодирующую слитый белок, составными частями которого являются аминокислотные последовательности белка E7-PISP70 и белка убиквитина дрожжей Saccharomyces cerevisiae, занимающего в составе слитого белка N-концевое положение, заканчивающегося сайтом процессинга, отделяющим его от последовательности белка E7-HSP70 и распознаваемым природными убиквитин-специфичными протеиназами дрожжей. Штамм дрожжей Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3853 - продуцент белка E7-HSP70 - получают путем трансформации вектором экспрессии pPDX3U-E7-HSP70 штамма дрожжей Saccharomyces cerevisiae D702. Группа изобретений обеспечивает высокий уровень биосинтеза и выход очищенного белка E7-HSP70, получение водорастворимого корректно процессированного белка E7-HSP70, принципиальное отсутствие в препаратах белка E7-HSP70 токсичного и пирогенного ЛПС бактерий
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" (RU)
1. Способ получения белка E7-HSP70 путем культивирования микроорганизма-продуцента в подходящей питательной среде с последующим выделением и очисткой целевого белка, отличающийся тем, что в качестве продуцента используют дрожжи Saccharomyces cerevisiae, трансформированные вектором экспрессии, который содержит область инициации репликации эндогенной 2-мкм плазмиды дрожжей Saccharomyces cerevisiae, а также промотор GAL1 дрожжей, контролирующий экспрессию гена, включающего последовательность ДНК SEQ ID NO:1, кодирующую слитый белок, составными частями которого являются аминокислотные последовательности белка E7-HSP70 и белка убиквитина дрожжей Saccharomyces cerevisiae, занимающего в составе слитого белка N-концевое положение, заканчивающегося сайтом процессинга, отделяющим его от последовательности белка E7-HSP70 и распознаваемым природными убиквитин-специфичными протеиназами дрожжей. 2. Штамм дрожжей Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3853 - продуцент белка E7-HSP70 для осуществления способа по п.1, полученный путем трансформации вектором экспрессии pPDX3U-E7-HSP70 штамма дрожжей Saccharomyces cerevisiae D702
70
Патент 2631922
Группа изобретений относится к микробиологической промышленности. Заявлены штамм дрожжей Yarrowia lipolytica Y-3753ch и штамм дрожжей Yarrowia lipolytica Y4215Leu+, обладающие способностью продуцировать янтарную кислоту. Штаммы микроорганизмов дрожжей Yarrowia lipolytica депонированы во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационными номерами ВКПМ Y-4215 и ВКПМ Y-4297 соответственно. Заявленные Штаммы микроорганизмов могут быть использованы для получения чистой янтарной кислоты. Изобретение позволяет получить чистую янтарную кислоту. 1. Штамм дрожжей Yarrowia lipolytica ВКПМ У-4215 - продуцент янтарной кислоты. 2. Штамм дрожжей Yarrowia lipolytica ВКПМ У-4297 - продуцент янтарной кислоты.
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") (RU)
1. Штамм дрожжей Yarrowia lipolytica ВКПМ У-4215 - продуцент янтарной кислоты. 2. Штамм дрожжей Yarrowia lipolytica ВКПМ У-4297 - продуцент янтарной кислоты.