Штаммы микроорганизмов

Изобретение относится к области биотехнологии. В частности, к способу синтеза пуринового нуклеозида 5'-аминоимидазол-4-карбоксамидрибозида (АИКАР) и штамму бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-10167 - продуценту пуринового нуклеозида 5'-аминоимидазол-4-карбоксамидрибозида (АИКАР). Пуриновый нуклеозид 5'-аминоимидазол-4-карбоксамидрибозид получают путем культивирования модифицированных бактерий Bacillus subtilis в подходящей питательной среде. В качестве модифицированных бактерий используют бактерии Bacillus subtilis, полученные путем последовательного внесения мутаций purR, purH::EmR, Pur?L и PrpsF-prs. Предложенное изобретение позволяет расширить арсенал способов микробиологического синтеза АИКАР и позволяет сконструировать штамм-продуцент АИКАР для осуществления этого способа. 2 н.п. ф-лы, 1 ил., 2

Штамм дрожжей Komagataella mondaviorum L7 ВКПМ Y-5248 с инактивированным геном LEU2 - реципиент для конструирования безмаркерных штаммов-продуцентов гетерологичных белков.

Штамм дрожжей Komagataella mondaviorum K7 ВКПМ Y-5249 с инактивированным геном HIS4 - реципиент для конструирования безмаркерных штаммов-продуцентов гетерологичных белков.

1. Гибридный белок, обладающий противоопухолевой активностью и заключающий в своем составе аминокислотную последовательность мутантной L-аспарагиназы бактерий Wolinella succinogenes, в которой аминокислотный остаток валина в положении 23 природной последовательности заменен на аминокислотный остаток глутамина, а аминокислотный остаток лизина в положении 24 природной последовательности заменен на остаток треонина, слитую с аминокислотной последовательностью гепарин-связывающего пептида НВ1, где гибридный белок имеет последовательность, указанную в SEQ ID NO: 3, или последовательность, указанную в положениях 161-508 SEQ ID NO: 1. 2. Штамм Escherichia coli ECR-89 - продуцент гибридного белка по п. 1, имеющего последовательность SEQ ID NO: 3, полученный путем трансформации реципиентного штамма E. coli BL21(DE3) плазмидой pET28-Was89, сконструированной на основе вектора pET28b(+) и содержащей структурный ген гибридного белка, имеющего последовательность SEQ ID NO: 3. 3. Штамм Escherichia coli ВКПМ В-11955 - продуцент гибридного белка по п. 1, имеющего последовательность, указанную в положениях 161-508 SEQ ID NO: 1. 4. Способ получения гибридного белка по п. 1, имеющего последовательность, указанную в положениях 161-508 SEQ ID NO: 1, путем культивирования штамма по п. 3 в условиях, обеспечивающих рост клеток этого штамма и биосинтез гибридного белка, с последующим отделением полученной клеточной биомассы и выделением из нее гибридного белка в условиях, обеспечивающих перевод гибридного белка либо во фракцию растворимых клеточных белков, либо во фракцию нерастворимых клеточных белков, и дальнейшей очисткой гибридного белка из белоксодержащей фракции с использованием методов ионообменной хроматографии и ультрафильтрации.

1. Рекомбинантный штамм Rhodococcus erythropolis ВКПМ Ас-1937, обладающий конститутивной ацилирующей активностью и полученный введением кодирующего ациламидазу фрагмента ДНК DAA37 из штамма Rhodococcus erythropolis ВКПМ Ас-1 и регуляторной области гена нитрилгидратазы из штамма Rhodococcus erythropolis М8 в реципиентный штамм Rhodococcus erythropolis ВКПМ Ас-1793. 2. Рекомбинантный штамм Rhodococcus erythropolis ВКПМ Ac-1938, обладающий конститутивной ацилирующей активностью и полученный введением кодирующего ациламидазу фрагмента ДНК DAA37 из штамма Rhodococcus erythropolis ВКПМ Ас-1 и регуляторной области гена нитрилгидратазы из штамма Rhodococcus erythropolis М8 в реципиентный штамм Rhodococcus erythropolis ВКПМ Ас-1267. 3. Способ синтеза N-замещенных акриламидов путем смешивания водных растворов акриламида и алифатического первичного амина с добавлением в качестве биокатализатора бактерий Rhodococcus erythropolis, обладающих ацилирующей активностью, отличающийся тем, что в качестве биокатализатора используют клетки рекомбинантного штамма по п.1 или 2.

Применение штамма дрожжей Komagataella pastoris ВКПМ Y-727 в качестве реципиента для конструирования продуцентов целевого белка, необязательно включающее введение в него мутаций, обеспечивающих использование ауксотрофных селективных маркеров.

1. Штамм бактерий Bacillus amyloliquefaciens ВКПМ В-11475, обладающий фунгицидным и бактерицидным действием. 2. Биологический препарат для защиты зерновых растений от заболеваний, вызываемых фитопатогенными грибами, полученный путём смешивания активного начала в виде культуральной жидкости штамма по п.1 с титром 2-3 х 109 КОЕ/мл и носителя в виде мелкодисперсных гранул диатомита в соотношении по объёму 1:3 с последующим высушиванием

1. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli SGM1.0 [pPYC] - продуцент янтарной кислоты, обладающий инактивированными генами ackA, pta, poxB, ldhA, adhE и активностью пируваткарбоксилазы. 2. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli по п.1, отличающийся тем, что активность пируваткарбоксилазы обеспечивается за счет введения в клетки штамма молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1. 3. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli SGM1.1 [pPYC] - продуцент янтарной кислоты, обладающий инактивированными генами ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, iclR и активностью пируваткарбоксилазы. 4. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli по п.3, отличающийся тем, что активность пируваткарбоксилазы обеспечивается за счет введения в клетки штамма молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1. 5. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli SGM2.0 [pPYC] - продуцент янтарной кислоты, обладающий инактивированными генами ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, усиленной экспрессией генов асеЕ, aceF, lpdA и активностью пируваткарбоксилазы. 6. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli по п.5, отличающийся тем, что активность пируваткарбоксилазы обеспечивается за счет введения в клетки штамма молекулы ДНК, содержащей ген, кодирующий фермент, обладающий активностью, классифицируемой как К.Ф. 6.4.1.1. 7. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli по п.5, отличающийся тем, что экспрессия генов асеЕ, aceF и lpdA усилена за счет замены в хромосоме штамма нуклеотидной последовательности природного промотора, контролирующего экспрессию генов aceEF-lpdA оперона, на более сильный промотор.

1. Гибридный белок GFN80, обладающий пролонгированным действием и представляющий собой рекомбинантный интерферон альфа-2 человека, слитый с N-конца с аминокислотной последовательностью полипептида S(G4S)16. 2. Гибридный белок GFN100, обладающий пролонгированным действием и представляющий собой рекомбинантный интерферон альфа-2 человека, слитый с N-конца с аминокислотной последовательностью полипептида S(G4S)20. 3. Способ получения гибридного белка по п.1 или 2 путем культивирования в подходящих условиях дрожжей Saccharomyces cerevisiae, трансформированных вектором экспрессии, который содержит область инициации репликации эндогенной 2-мкм плазмиды дрожжей Saccharomyces cerevisiae, а также промотор GAL1 дрожжей, контролирующий экспрессию гена, включающего последовательность ДНК SEQ ID NO:1 или SEQ ID NO:2, соответственно, с последующим выделением гибридного белка из культуральной жидкости. 4. Штамм Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3927, предназначенный для осуществления способа по п.3 и полученный путем введения нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:1 в составе плазмиды р71-81 в клетки штамма-реципиента, являющегося бесплазмидным производным штамма Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3550. 5. Штамм Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3928, предназначенный для осуществления способа по п.3 и полученный путем введения нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:2 в составе плазмиды р71-82 в клетки штамма-реципиента, являющегося бесплазмидным производным штамма Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3550

Штамм дрожжей Yarrowia lipolytica ВКПМ Y-3753 - продуцент янтарной кислоты.